SPAKキナーゼ阻害薬の開発

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 25670406
• 研究機関: 東京医科歯科大学
• 研究代表者: 内田 信一 東京医科歯科大学, 医歯(薬)学総合研究科, 教授 (50262184)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: キナーゼ / ケミカルライブラリー / 高血圧

研究実績の概要

前年度には、SPAKキナーゼ活性をモニター出来る高感度ELISA系を用いてスクリーニング系を構築し、医科歯科大学所蔵の化合物ライブラリー（約２万種）をスクリーニングした。
得られたhit化合物のvitroや培養細胞での活性を評価しつつ、毒性軽減の立場から慶応大学薬学部水島教授の御協力を得て、既存やライブラリーもスクリーニングし、クロサンテルという駆虫薬がSPAK阻害活性を持つことも明らかとなった。
その後、これらのseed化合物の誘導体展開をすすめ、主として培養細胞系にて評価し、より毒性の低いものを動物に投与して、生体での阻害活性を検討した。
その結果、クロサンテルが結果的に一番動物における毒性は低く、腎臓や大動脈でSPAKの活性を反映しているNa-Cl共輸送体、Na-K-2Cl輸送体のリン酸化を押さえる事が判明し、vivoでも効果があることが判明した。急性効果としては血圧の低下作用も確認できたが、これは利尿作用と言うよりは、血管平滑筋への作用と考えられた。
今後は、更なる効果の増強と毒性の低下を誘導体展開ですすめていく。

研究成果

• [雑誌論文] Discovery of novel SPAK inhibitors that block WNK kinase signaling to cation chloride transporters. (2015)
  • 著者名/発表者名: Kikuchi E, Mori T, Zeniya M, Isobe K, Ishigami-Yuasa M, Fujii S, Kagechika H, Ishihara T, Mizushima T, Sasaki S, Sohara E, Rai T, Uchida S.
  • 雑誌名: J Am Soc Nephrol 巻: 未定 ページ: 未定
  • DOI: doi: 10.1681/ASN.2014060560
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Kelch-like protein 2 mediates angiotensin II-with no lysine 3 signaling in the regulation of vascular tonus (2015)
  • 著者名/発表者名: Zeniya M, Morimoto N, Takahashi D, Mori Y, Mori T, Ando F, Araki Y, Yoshizaki Y, Inoue Y, Isobe K, Nomura N, Oi K, Nishida H, Sasaki S, Sohara E, Rai T, Uchida S.
  • 雑誌名: J Am Soc Nephrol 巻: 未定 ページ: 未定
  • DOI: doi: 10.1681/ASN.2014070639
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Aberrant glycosylation and localization of polycystin-1 cause polycystic kidney in an AQP11 knockout model. (2014)
  • 著者名/発表者名: Inoue Y, Sohara E, Kobayashi K, Chiga M, Rai T, Ishibashi K, Horie S, Su X, Zhou J, Sasaki S, Uchida S.
  • 雑誌名: J Am Soc Nephrol 巻: 25 ページ: 2789~2799
  • DOI: doi: 10.1681/ASN.2013060614.
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Impaired degradation of WNK1 and WNK4 kinases causes PHAII in mutant KLHL3 knock-in mice. (2014)
  • 著者名/発表者名: Susa K, Sohara E, Rai T, Zeniya M, Mori Y, Mori T, Chiga M, Nomura N, Nishida H, Takahashi D, Isobe K, Inoue Y, Takeishi K, Takeda N, Sasaki S, Uchida S.
  • 雑誌名: Hum Mol Genet. 巻: 23 ページ: 5052~5060
  • DOI: doi: 10.1093/hmg/ddu217.
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] WNK4 is the major WNK kinase positively regulating NCC in the mouse kidney. (2014)
  • 著者名/発表者名: Takahashi D, Mori T, Nomura N, Khan MZ, Araki Y, Zeniya M, Sohara E, Rai T, Sasaki S, Uchida S.
  • 雑誌名: Biosci Rep. 巻: 34 ページ: 195~205
  • DOI: doi: 10.1042/BSR20140047.
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Regulation of with-no-lysine kinase signaling by Kelch-like proteins. (2014)
  • 著者名/発表者名: Uchida S, Sohara E, Rai T, Sasaki S.
  • 雑誌名: Biol Cell. 巻: 106 ページ: 45~56
  • DOI: doi: 10.1111/boc.201300069.
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Regulation of blood pressure and renal electrolyte balance by Cullin-RING ligases. (2014)
  • 著者名/発表者名: Uchida S.
  • 雑誌名: Curr Opin Nephrol Hypertens. 巻: 23 ページ: 487~493
  • DOI: doi: 10.1097/MNH.0000000000000049.
• [学会発表] Impaired KLHL3-Mediated Ubiquitination of WNK4 Causes Human Hypertension. (2014)
  • 著者名/発表者名: Uchida S.
  • 学会等名: The 47th Annual Meeting of American Society of Nephrology
  • 発表場所: フィラデルフィア、米国
  • 年月日: 2014-11-13 – 2014-11-16
  • 招待講演