GABA-A受容体膜輸送およびリン酸化調節による麻酔作用制御法開発

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 25670663
• 研究機関: 弘前大学
• 研究代表者: 上野 伸哉 弘前大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (00312158)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2015-03-31
• キーワード: extrasynaptic / 受容体トラフィッキング / 脱リン酸化調節 / GABA-A受容体 / 麻酔薬

研究実績の概要

１）GABA-A受容体の細胞内可視化
細胞レベルでのGABA-A受容体の細胞内および膜上での可視化のため、GABA-A受容体の各サブユニット配列に標識タンパク質を導入したプラスミドを作成した。標識導入サブユニットをHEK293細胞に強制発現させ、GABA投与によりCl-イオン電流をパッチクランプ法を用いて測定した。可視化タンパク質導入GABA-A受容体のGABA応答が野生型の応答と有意な変異がないことを確認した。
２）トラフィッキング関連タンパク質探索
脳組織の膜画分を1) 前シナプス、2)後シナプスおよび、3)シナプス外の3 部位に分画する方法を確立した。各分画のタンパク質を用いて、PRIP-1 欠損マウスと野生型を比較し、後シナプスおよびシナプス外に共通して欠損しているタンパク質の存在を確認した。制御タンパク質探索のためのプロテオーム解析を行う予定である。

研究成果

• [雑誌論文] The kick-in system: a novel rapid knock-in strategy (2014)
  • 著者名/発表者名: Tomonoh, Y. Deshimaru, M. Araki, K. Miyazaki, Y. Arasaki, T. Tanaka, Y. Kitamura, H. Mori, F. Wakabayashi, K. Yamashita, S. Saito, R. Itoh, M. Uchida, T. Yamada, J. Migita, K. Ueno, S. Kitaura, H. Kakita, A. Lossin, C. Takano, Y. Hirose, S.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 9 ページ: e88549
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0088549. eCollection 2014.
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Morphological and electrophysiological changes in intratelencephalic-type pyramidal neurons in the motor cortex of a rat model of levodopa-induced dyskinesia (2014)
  • 著者名/発表者名: Ueno, T. Yamada, J. Nishijima, H. Arai, A. Migita, K. Baba, M. Ueno, S. Tomiyama, M.
  • 雑誌名: Neurobiology of disease 巻: 64 ページ: 142-149
  • DOI: 10.1016/j.nbd.2013.12.014.
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [学会発表] プロポフォールとエトミデートが麻酔脳波および睡眠・覚醒サイクルに与える影響 (2015)
  • 著者名/発表者名: Yoshikazu, Nikaido, Sachie, Takada, Tomonori, Furukawa, Keisuke, Migita, Yuko, Shiba, Junko, Yamada, Tetsuya, Kushikata, Kazuyoshi, Hirota, Shuji, Shimoyama, Taku, Ozaki, Kazuhiko, Nakamura, Takashi, Kanematsu, Masato Hirata, Shinya, Ueno
  • 学会等名: 第92回日本生理学会大会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2015-03-21 – 2015-03-23
• [学会発表] 前頭葉てんかんにおける新たな発症予防戦略 (2014)
  • 著者名/発表者名: 上野伸哉
  • 学会等名: 第48回 日本てんかん学会学術集会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2014-10-02 – 2014-10-03
  • 招待講演
• [学会発表] 繰返し拘束ストレスに対するPRIP-1ノックアウトマウスの行動反応 (2014)
  • 著者名/発表者名: Nikaido Y., Shimoyama S., Ozaki T., Migita K., Shiba Y., Furukawa T., Yamada J., Kanematsu T., Hirata M., Nakamura K. and Ueno S.
  • 学会等名: 第37回日本神経科学会大会 Neuroscience 2014
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2014-09-11 – 2014-09-13
• [備考] 弘前大学 大学院医学研究科 脳神経生理学講座
  • URL: http://www.med.hirosaki-u.ac.jp/~neurophysiol/