研究課題/領域番号 |
26440134
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研究機関 | 新潟大学 |
研究代表者 |
酒井 達也 新潟大学, 自然科学系, 教授 (10360554)
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研究期間 (年度) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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キーワード | 植物 / 光環境応答 / フォトトロピン / 光屈性 |
研究実績の概要 |
根の光屈性に正に働く転写因子 ARF7・ARF19 の機能調節機構を明らかにすべく、YFP融合遺伝子を作成し、遺伝子を導入した形質転換体を作成した。表現型を詳細に解析すべく、T3 世代種子の収穫を行った。細胞内局在を調べた結果、ARF19 は期待通り核に局在したが、ARF7 は核以外のところにも粒子状に局在が観察されたので、これがアーティファクトによる結果なのかどうか検証中である。また青色光によって発現量や分子量に変化が現れないかウエスタンブロット解析を行うべく、種子を増幅中である。 ARF 転写因子の機能調節に働く Aux/IAA 転写制御因子の網羅的機能解析を行った。1つの Aux/IAA 遺伝子に特徴的な偏差成長異常が観察された。現在、YFP 融合遺伝子を作成し、その発現解析を行う準備を進めている。 根におけるフォトトロピンシグナル依存的な遺伝子発現制御機構について解析すべく、RNA-seq 解析を行った。期待通り、候補遺伝子が選抜された。これらの候補遺伝子が本当にphot 活性化に依存しているか確認するため、現在コントロールサンプルによるRNA-seq 解析を準備中である。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
Aux/IAA 優性変異体の網羅的解析を予定通り終えた。またARF及びTIR の発現解析について順調に解析を進めている。RNA-seq を用いた網羅的遺伝子発現解析についても、1回の解析を終え、サンプルの育成条件を変えて、現在もう一度解析を行うべく順調に準備を進めている。
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今後の研究の推進方策 |
ARF-YFP, TIR-YFP のウエスタンブロットによる発現解析、細胞内局在解析を行い、photによる発現、タンパク質修飾、細胞内局在、の制御の有無を明らかにする。RNA-seq によりphotによる遺伝子発現調節を介した光屈性誘導の可能性を検討する。いくつかの遺伝子については phot 転写制御遺伝子候補として既に選抜済みなので、これらの遺伝子の光応答における機能を分子遺伝学的に解析する。これまでの結果をまとめ、論文発表を行う。
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次年度使用額が生じた理由 |
初年度の計画の遅れにより繰越額が多かった。今年度、計画の遅れを取り戻すように研究を進め順調に推移したが、一部はさらに次年度繰越の研究内容が残った。
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次年度使用額の使用計画 |
次年度4月中にも、今年度研究内容を実施し、繰越した助成金を使用する予定である。
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