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放射線照射（IR）によって生じるDNA損傷の中でも、DNA二本鎖切断（DSB）は最も重篤な損傷であり、その修復の成否は細胞の生死を決める。DSBに対する修復経路は、non-homologous end joining(NHEJ)及びhomologous recombination(HR)の2つがある。NHEJは簡略化された分子機構とそれに伴う素早い修復速度で迅速にDSBを修復する。一方でHRは姉妹染色分体必要であるためS/G2期のみで機能する。HR最大の利点はその正確な修復反応機構である。これまでの申請者らの研究から、ヒトS/G2期細胞においてIR期後に用いられる主要経路はNHEJであり、HRはマイナー経路であることが分かっている。また、NHEJがDSB修復の第一選択であり、NHEJからHRへの移行、つまりHR開始点が両修復経路決定の運命を担う分岐点であることが分かってきた。本研究ではHR開始に関わる新規DNA-end resection因子を探索し、HR開始点における新モデルを提案することを目的として研究を行った。本研究では転写に関与する因子群に着目し、siRNAライブラリー及びIP-MSを用いた別々の方法により、合計５つの新規HR候補因子が見出された。これらの因子をsiRNAによりノックダウンした細胞ではRPAのリン酸化だけではなく、RAD51 foci形成の減少及びHR頻度の低下が認められた。しかしこれらの因子は従来のDSB修復因子とは異なりfociを形成しない。そのためDSBを優先的に誘発する730nmレーザーを用い、GFP融合タンパクとしてその一連の修復に関わる分子動態を研究した。以上の結果から、本研究では転写と共役する相同組換え修復機構とその分子群の機能が明らかになった。
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