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2012 Fiscal Year Annual Research Report

溶液論と計算科学的手法によるABCトランスポータの構造変化と機能発現機構の解明

Planned Research

Project AreaWater plays a key role in ATP hydrolysis and ATP-driven functions of proteins
Project/Area Number 20118006
Research InstitutionTokyo Institute of Technology

Principal Investigator

櫻井 実  東京工業大学, バイオ研究基盤支援総合センター, 教授 (50162342)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 原野 雄一  大阪大学, たんぱく質研究所, 准教授 (60456259)
Project Period (FY) 2008-04-01 – 2013-03-31
KeywordsABCトランスポーター / ATP / 水 / 自由エネルギー / MDシミュレーション / 水和エントロピー / 水和エンタルピー
Outline of Annual Research Achievements

1.前年度ABCトランスポーターCFTRのinward-facing構造に対するMDシミュレーションを行い、NBDにATPが結合しているときのみNBDが二量体化することを示した。本年度では、数10Åも離れた2つのNBDがATPが存在するとなぜ接近し接着するのかを解明するため、MDシミュレーションのトラジェクトリーデータからNBD部分のみをピックアップし、3D-RISM法で水和の熱力学量を計算した。その結果、NBDの接近過程は水和エンタルピーによって、接触・結合過程は水和エントロピーによって駆動されていることが判明した。
2.ATPの加水分解の役割を調べるため、NBD二量体化の自由エネルギーを次の3つの状態について計算した。すなわち、1)加水分解前で2つのATPが結合している状態、2)加水分解直後でADP+Piの状態、3)Pi放出後で2つのADPが結合している状態。その結果、1)では6~7kcal/mol程度の結合エネルギー利得が得られた。2)では2.5kcal/mol程度まで減少していたが、まだ二量体の形成に十分なエネルギー利得があった。3)のPi放出後はじめて結合エネルギーは正となり二量体は解離することが判明した。したがって、ATPの加水分解が直接の原因となって蛋白質の運動が誘起されることは考えにくい。なお、1)と2)の状態でNBD二量体化の自由エネルギーが負になる主要な原因は水のエントロピー効果であることが判明した。
3.TM287/288のX線構造を鋳型としてCFTRのホモロジーモデリングをやり直し、MDシミュレーションを実行した。NBDにATPが結合した系では、ATP分子がWalker AとSignatureモチーフにサンドイッチされることによりNBDが二量体化するとともに、TMDも明白な構造変化を示し、塩素イオンの輸送経路が形成されることが見出された。

Research Progress Status

24年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

24年度が最終年度であるため、記入しない。

  • Research Products

    (16 results)

All 2013 2012

All Journal Article (5 results) (of which Peer Reviewed: 5 results) Presentation (11 results)

  • [Journal Article] Dynamics and structural changes induced by ATP and/or substrate binding in the inward-facing conformation state of P-glycoprotein2013

    • Author(s)
      Y. Watanabe, W-L. Hsu, S. Chiba, T. Hayashi, T. Furuta, M. Sakurai
    • Journal Title

      Chem. Phys. Lett

      Volume: 557 Pages: 145-149

    • DOI

      DOI:10.1016/j.cplett.2012.12.040

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] The Power Stroke Driven by ATP Binding in CFTR As Studied by by ATP Binding in CFTR As Studied by Molecular Dynamics Simulations2013

    • Author(s)
      T. Furukawa-Hagiya
    • Journal Title

      J. Phys. Chem. B

      Volume: 117 Pages: 83-93

    • DOI

      10.1021/jp308315w

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Application of Hydration Thermodynamics to the Evaluation of Protein Structures and Protein-Ligand Binding2012

    • Author(s)
      Y. Harano
    • Journal Title

      Entropy

      Volume: 14 Pages: 1443-1468

    • DOI

      DOI:10.3390/e14081443

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] A scoring function based on solvation thermodynamics for protein structure prediction2012

    • Author(s)
      S. Du
    • Journal Title

      Biophysics

      Volume: 8 Pages: 127-138

    • DOI

      10.2142/biophysics.8.127

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Full-Quantum chemical calculation of the absorption maximum of bacteriorhodopsin: a comprehensive2012

    • Author(s)
      T. Hayashi
    • Journal Title

      Biophysics

      Volume: 8 Pages: 115-125

    • DOI

      10.2142/biophysics.8.115

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] Full-quantum chemical calculations of the absorption maxima of retinal proteins2012

    • Author(s)
      櫻井実
    • Organizer
      第50回生物物理学会
    • Place of Presentation
      名古屋大学(愛知)
    • Year and Date
      2012-09-22 – 2012-09-24
  • [Presentation] Dynamics and structural changes of ABCB1 transporter induced by binding of substrates and inhibitors2012

    • Author(s)
      櫻井実
    • Organizer
      第50回生物物理学会
    • Place of Presentation
      名古屋大学(愛知)
    • Year and Date
      2012-09-22 – 2012-09-24
  • [Presentation] The chrolide ion uptake mechanism in pharaonis halorhodopsin as studied by the energy representation method2012

    • Author(s)
      櫻井実
    • Organizer
      第50回生物物理学会
    • Place of Presentation
      名古屋大学(愛知)
    • Year and Date
      2012-09-22 – 2012-09-24
  • [Presentation] ATP-binding induced conformational change in CFTR as studied by MD simulation2012

    • Author(s)
      櫻井実
    • Organizer
      第50回生物物理学会
    • Place of Presentation
      名古屋大学(愛知)
    • Year and Date
      2012-09-22 – 2012-09-24
  • [Presentation] Calculation of the binding free energy of ATP to the nucleotide binding domain of an ABC transporter2012

    • Author(s)
      櫻井実
    • Organizer
      第50回生物物理学会
    • Place of Presentation
      名古屋大学(愛知)
    • Year and Date
      2012-09-22 – 2012-09-24
  • [Presentation] ABCトランスポーターのヌクレオチド結合ドメインへのATPの結合エネルギーの計算2012

    • Author(s)
      櫻井実
    • Organizer
      第12回日本蛋白質科学会年会
    • Place of Presentation
      名古屋国際会議場(愛知)
    • Year and Date
      2012-06-20 – 2012-06-22
  • [Presentation] 分子動力学シミュレーションによるABCトランスポーターMsbAにおけるカップリング・ヘリックス変異の構造的影響2012

    • Author(s)
      櫻井実
    • Organizer
      第12回日本蛋白質科学会年会
    • Place of Presentation
      名古屋国際会議場(愛知)
    • Year and Date
      2012-06-20 – 2012-06-22
  • [Presentation] ABCトランスポーターCFTRチャネルのATP加水分解駆動ゲーティング機構の解析2012

    • Author(s)
      櫻井実
    • Organizer
      第12回日本蛋白質科学会年会
    • Place of Presentation
      名古屋国際会議場(愛知)
    • Year and Date
      2012-06-20 – 2012-06-22
  • [Presentation] MM-PB/SA法によるタンパク質リガンド間結合自由エネルギー計算の再現性向上を目指して2012

    • Author(s)
      櫻井実
    • Organizer
      第12回日本蛋白質科学会年会
    • Place of Presentation
      名古屋国際会議場(愛知)
    • Year and Date
      2012-06-20 – 2012-06-22
  • [Presentation] ER法によるハロロドプシンの塩素イオン取り込み機構の解明2012

    • Author(s)
      櫻井実
    • Organizer
      第12回日本蛋白質科学会年会
    • Place of Presentation
      名古屋国際会議場(愛知)
    • Year and Date
      2012-06-20 – 2012-06-22
  • [Presentation] MDシミュレーションによるCFTRタンパク質のATP結合誘導NBD二量体化の解析2012

    • Author(s)
      櫻井実
    • Organizer
      第12回日本蛋白質科学会年会
    • Place of Presentation
      名古屋国際会議場(愛知)
    • Year and Date
      2012-06-20 – 2012-06-22

URL: 

Published: 2018-02-02  

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