2002 Fiscal Year Annual Research Report
EBウイルス遺伝子EBERのアポトーシスおよびインターフェロン抵抗性に関する研究
| Project/Area Number |
00J60708
|
|---|
| Research Institution | Hokkaido University |
|---|
Principal Investigator |
南保 明日香 北海道大学, 遺伝子病制御研究所, 特別研究員(PD)
|
|---|
| Keywords | Epstein-Barrウイルス / バーキットリンパ腫 / EBER / インターフェロン / アポトーシス / PKR |
|---|
| Research Abstract |
本研究において、種々のバーキットリンパ腫(BL)細胞株を用いて種々の解析を行った結果、1.EBウイルス(EBV)がウイルス感染細胞において、インターフェロン(IFN)-αが誘導するアポトーシスに対する抵抗性を賦与すること、また、2.EBVがコードする小RNA(EBER)が、IFN-αが誘導するアポトーシス抵抗性に関与する責任遺伝子であること、3.EBERはセリン/スレオニン型キナーゼPKRの活性化、さらにその基質であるeIF-2αおよびIκBαのリン酸化を阻害することによってIFN-αが誘導するアポトーシス抵抗性を示すこと、4.細胞内において、EBERがPKRと結合すること、またPKR活性の抑制にはPKRとの結合が必須であることを明らかにした。
従来、EBV感染上皮細胞におけるEBV遺伝子の発現パターンは、BLと同様であることが知られている、しかしながら、上皮細胞におけるEBERの役割は明確ではない。そこで、ヒト小腸由来上皮細胞株Intestine 407細胞株をモデルとして用いて、以下に示す種々の解析を行った。
第一にEBV感染クローンを構築し、この細胞株についてIFN-α処理を行い、フローサイトメトリーを用いたSubG1期アポトーシスアッセイを行った。さらに、EBER遺伝子を導入した細胞株を用いて同様の解析を行った。さらにこれらの細胞株について、EBV感染およびEBERがPKR活性化に与える影響を調べた。
その結果、EBVは上皮細胞において、1.IFN-αが誘導するアポトーシスに対する抵抗性を賦与すること、また、2.EBERがIFN-αが誘導するアポトーシス抵抗性に関与する責任遺伝子であるということ、3.EBERはPKR経路を阻害することにより、IFN-αが誘導するアポトーシス抵抗性を示すことを明らかにした。
|
