2003 Fiscal Year Annual Research Report
扁平上皮癌における遺伝子学的解析に基づく癌の質的評価法・早期発見法の開発
Project/Area Number |
03J52161
|
Research Institution | Chiba University |
Principal Investigator |
森谷 哲浩 千葉大学, 大学院・医学薬学府, 特別研究員(DC2)
|
Keywords | 口腔扁平上皮癌 / C1orf10遺伝子 / cDNA Microarray / 脱メチル化 |
Research Abstract |
1)独自に開発した口腔疾患解析用cDNA Microarrayを用いて、2種類の口腔癌細胞株(HSC-3,HSC4)と4症例の口腔扁平上皮癌組織で、共通して発現亢進している7種類の遺伝子と発現減弱している1種類の遺伝子を同定した。半定量的RT-PCR、および定量的real time PCRによりこれらのマイクロアレイの結果を確認した。これらの遺伝子のうち共通して発現減弱が認められたC1orf10遺伝子に着目して以下の実験を行った。C1orf10遺伝子の発現減弱は口腔癌40症例中24例(60.0%)に、また9種類の口腔癌由来細胞株全てに認められた。Direct sequence法によりC1orf10遺伝子の突然変異を検索したが、いずれの症例、細胞株においても変異は認められなかった。また、9種類全ての細胞株においてdemethylating agentである5-aza-2'-deoxycytidine(5-AzaC)処理によっても、mRNA発現は回復しなかった。C1orf10遺伝子は、機能についてはまだ艮く分かっていないが、食道扁平上皮癌において特異的に発現減弱が認められることが既に知られている。本研究で口腔の扁平上皮癌においても発現減弱が認められ、C1orf10遺伝子は扁平上皮癌関連新規癌抑制遣伝子の可能性が高い。先に作成したcDNAライブラリーよりC1orf10遺伝子の完全長のクローンを選び出すことができたので、今後、C1orf10遺伝子の制御機構を解明するために、C1orf10発現減弱細胞中でC1orf10遺伝子強制発現等を行ない、機能解析をする予定である。 2)口腔扁平上皮癌と正常口腔粘膜それぞれから抽出したタンパク質を2次電気泳動により比較検討し、約24種類の発現状態の異なるタンパク質スポットを検出した。現在、これらのスポットのうち、特に正常組織と癌組織とにおける発現状態の相違が大きく異なるものについて、タンパク質の同定を進めている。
|
Research Products
(1 results)
-
[Publications] Moriya, T., Seki, N., Shimada K., Kato, N., Yakushiji, T., Nimura, Y., Uzawa, K., Takiguchi, M., Tanzawa, H.: "In-house cDNA microarray analysis of gene expression profiles involved in SCC cell lines"International Journal of Molecular Medicine. 12. 429-435 (2003)