肺移植における免疫寛容の誘導と機構解析-T細胞抑制性接着分子CTLA-4の発現とその役割-

2000 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12671298
• Research Institution: Chiba University
• Principal Investigator: 齋藤 幸雄 千葉大学, 医学部・附属病院, 講師 (60261905)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 斎藤 隆 千葉大学, 大学院・医学研究科, 教授 (50205655) ; 藤澤 武彦 千葉大学, 医学部, 教授 (80110328) ; 関根 康雄 千葉大学, 医学部・附属病院, 助手 (70312957) ; 馬場 雅行 千葉大学, 医学部, 助教授 (00143305)
• Keywords: 肺移植 / ラット / CTLA-4 / ドナー特異的輸血 / 免疫寛容

Research Abstract

平成12年度の研究実績
1)Donor specific transfusion(DST)によるrecipient脾臓T細胞内部でのATLA-4発現
基礎実験としてDSTが脾臓T細胞でのCTLA-4およびCD28の発現にどのように関与するかを検討した。BNからF344へのDST7日後に脾臓T細胞を分離し、CD24およびCTLA-4に対する抗体による免疫染色を行い、T細胞表面はFACSで,T細胞内部での発現は共焦点レーザー顕微鏡を用いて観察した。コントロールとして無処置の脾臓T細胞を同様に染色観察した。その結果CD28では無処置,DST後7日のT細胞の両者とも細胞表面・細胞内とも発現していた。一方CTLA-4では無処置群では細胞表面・細胞内ともに発現が見られなかったのに対し、DST群では細胞表面での発現はなかったものの、細胞内での発現はT細胞の20%に認められた。この結果よりDSTはT細胞内でのCTLA-4誘導に関与する可能性が示唆された。
2)DSTによる移植肺生着延長効果
BNからF344ラットへの肺移植モデルにおいて、移植前7日にDSTを行うことにより移植肺生着延長効果がみられた。具体的には無処置群では移植後7日でgrade3〜4の急性拒絶反応が認められたのに対し、DST群ではgrade1〜2と軽度の拒絶反応に留まった。Third partyとしてACIラットの血液をF344に輸血し、7日後にBNからF344への肺移植を試みたところgrade3の拒絶反応が認められ、DSTがドナー特異的である可能性が示唆された。