2001 Fiscal Year Annual Research Report
物理的および化学的方法による血液中のウイルスの除去・不活性化
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12794016
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| Research Institution | Hokkaido University |
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Principal Investigator |
加茂 直樹 北海道大学, 大学院・薬学研究科, 教授 (10001976)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
東 寛 北海道赤十字血液センター, 研究部長
池田 久實 北海道赤十字血液センター, 所長
宮内 正二 北海道大学, 大学院・薬学研究科, 助教授 (30202352)
平山 順一 北海道赤十字血液センター, 研究部員
阿部 英樹 北海道赤十字血液センター, 研究部係長
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| Keywords | ヒトパルボウイルスB19 / カテキン / UVC / メチレンブルー / 活性酸素 / ピリミジンダイマー / 6-4付加体 / 血液凝固第VIII因子 |
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| Research Abstract |
1)ヒトパルボウイルスB19は,従来の不活化法であるsovent/detergent法では不活化できないウイルスである.また,その小さのためフィルターで除くこともできない.短波長紫外線(UVC)照射による不活化を試みた.このため,赤芽球系細胞を利用した感染性アッセイ法を開発した.このアッセイ法を用いて,UVC照射により実用化出来る程度にまで不活化できることを示した.多くの場合,第VIII因子製剤中のB19が問題となるため,第VIII因子のUVCからの保護が必要となったが,カテキン類の保護剤の添加により,これを回避出来た.
2)ジメチルメチレンブルーはメチレンブルーよりも優れた光増感剤である.このジメチルメチレンブルーを用いてヘモグロビン溶液を光不活化処理したときの起こる不活化の機構および問題点について明らかにした.不活化の機構は活性酸素によることが明らかになった.活性酸素が関与するため,ヘモグロビンが酸化されてしまう問題点があることを明らかにした.この問題点の克服は次年度のテーマである.
3)UVC照射によるウイルスの不活化機構について実験した.UVC照射によって,ウイルス核酸が損傷を受け,ピリミジンダイマーおよび6-4付加体が出来る事は知られていた.しかし,これらの損傷の程度と不活化との相関は今まで殆ど研究されたことがない.M13ファージをモデルウイルスとしての実験の結果,よい相関が見られた.また,ウイルスのタンパクには損傷が見られなかった.活性酸素の関与も否定された.従って,UVCはウイルスの核酸に損傷を与えることにより,不活化すると結論した.
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Research Products
(6 results)
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[Publications] H.Abe, K.Ikebuchi et al.: "Methylene blue photosensitization"Recent Res. Devel. Photochem. and Photobiol.. 5. 163-173 (2001)
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[Publications] J.Hirayama, S.J.Wagner.et al.: "Involvement of reactive oxygen species in hemoglobin oxidation and virus inactivation by 1, 9-dimethylmethylene blue"Biol. Pharm. Bull.. 24. 418-421 (2001)
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[Publications] H.Sugawara et al.: "Inactivation of parvovirus B19 in coaguration factor concentrates by UVC irradiation"Transfusion. 41. 456-461 (2001)
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[Publications] J.Hirayama et al.: "Comparison of the effects of different antiviral treatment on the antioxidant systems of stroma-free hemoglobin"Photochem. Photobiol.. 74. 461-464 (2001)
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[Publications] H.Abe et al.: "Virus inactivation in hemoglobin solution by heat treatment"Artf. Cells Blood Substit. Immobil. Bioechnol.. 29. 381-388 (2001)
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[Publications] J.Hirayama et al.: "Inactivation of stroma-free hemoglobin by photosensitization with 1, 9-dimethylmethylene blue"Trends in Photochemistry and Photobiology. 8. 153-158 (2001)
