2000 Fiscal Year Annual Research Report

毒化ホタテガイ中腸腺における麻痺性貝毒結合タンパク

Research Project

Project/Area Number	12876049
Research Institution	Kitasato University
Principal Investigator	児玉正昭北里大学, 水産学部, 教授 (40050588)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	酒井隆一北里大学, 水産学部, 助教授 (20265721) 佐藤繁北里大学, 水産学部, 助教授 (20170748)
Keywords	麻ひ性貝毒 / ホタテガイ / 結合タンパク / チオール化合物 / メタロチオネイン
Research Abstract	大船渡湾に設置した定点に無毒のホタテガイを移植し、その毒性を経時的に調べAlexandrium tamarenseの発生により高度に毒化したホタテガイ試料を得た。毒化ホタテガイより摘出した中腸腺を液体窒素中でホモジナイズし抽出したタンパク画分をゲル濾過に付して低分子の毒成分を除去し、得られたタンパク画分をメルカプトエタノールで処理して麻ひ性貝毒(PSP)成分の遊離を観察したところ、蓄積したPSP量の6-10%のsaxitoxin(STX)が遊離するのが観察された。次に遊離したSTXを含む画分よりBio-Gel P-2により部分精製したSTXをLC-MSで分析し、標品STXと同じretention timeにSTXと同一のマススペクトラムを示す成分を確認した。この結果はA.tamarenseの捕食でホタテガイが取り込んだPSPの一部がホタテガイのタンパクのシステイン残基のSH基と結合していることを示すものである。PSPと結合したタンパクは、ホタテガイ中腸腺の水抽出した抽出残査をさらにtriton Xを含むbufferで抽出した膜タンパク画分にも認められ、毒の結合量は膜タンパク画分の方が遥かに大きかった。この結果は毒が特殊なタンパクに結合するのではなく、種々のタンパクのシステイン残基に非特異的に結合することを示唆した。このことを確認するため、構成アミノ酸の3分の1がシステインであるキレートタンパク、メタロチオネインに着目し、市販のウサギメタロチオネインとGTX1,4を混合したものを室温で一晩放置したところ、加えた毒の一部が結合することが判明し、上記の考え方を裏付ける結果が得られた。

Research Products

(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] K.Sekiguchi,Masaaki Kodama et al.: "Accumulation and depuration kinetics of paralytic shellfish toxins in the scallop Patinopecten yessoensis fed Alexandrium tamarense"Marine Ecology-Pregress Series. (in press).
[Publications] K.Sekiguchi,M.Kodama et al.: "Accumulation of paralytic shellfish toxins in the scallop Patinopecten yessoensis caused by the dinoflagellate Alexandrium catenella in Otsuchi Bay, lwate Prefecture, northem Pacific coast of Japan"Fisheries Science. (in press).
[Publications] Sigeru Sato,Masaaki Kodama et al.: "Frequent occurrence of paralytic shellfish poisoning toxins as dominant toxins in marine puffer from tropical water"Toxicon. 38巻. 1101-1109 (2000)
[Publications] S.Sato,R.Sakai.,M.Kodama: "Identification of thioether intermediates in the reductive transformation of gonyautoxins into saxitoxins by thiols."Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters. 10巻. 1787-1789 (2000)
[Publications] Setsuko Sakamoto,Masaaki Kodama et al.: "Formation of intermediate conjugates in the reductive transformation of gonyautoxins to saxitoxins by thiol compounds"Fisheries Science. 66巻. 136-141 (2000)
[Publications] R.Groben,M.Kodama et al.: "16S rRNA Targeted Probes for the ldentification of Bacterial Strains lsolated from Cultures of the Toxic Dinoflagellate Alexandrium tamarense"Microb.Ecol.. 39巻. 186-196 (2000)
[Publications] Masaaki Kodama: "Seafood and Freshwater Toxins : Pharmacology, Physiology, and Detection (Botana,L.M.,Ed.) Part 6.Paralytic Shellfish Poisoning"Marcel Dekker,Inc. : New York, Basel. 798 (2000)

2000 Fiscal Year Annual Research Report

毒化ホタテガイ中腸腺における麻痺性貝毒結合タンパク

Principal Investigator

児玉 正昭 北里大学, 水産学部, 教授 (40050588)

Research Products

[Publications] K.Sekiguchi,Masaaki Kodama et al.: "Accumulation and depuration kinetics of paralytic shellfish toxins in the scallop Patinopecten yessoensis fed Alexandrium tamarense"Marine Ecology-Pregress Series. (in press).

[Publications] K.Sekiguchi,M.Kodama et al.: "Accumulation of paralytic shellfish toxins in the scallop Patinopecten yessoensis caused by the dinoflagellate Alexandrium catenella in Otsuchi Bay, lwate Prefecture, northem Pacific coast of Japan"Fisheries Science. (in press).

[Publications] Sigeru Sato,Masaaki Kodama et al.: "Frequent occurrence of paralytic shellfish poisoning toxins as dominant toxins in marine puffer from tropical water"Toxicon. 38巻. 1101-1109 (2000)

[Publications] S.Sato,R.Sakai.,M.Kodama: "Identification of thioether intermediates in the reductive transformation of gonyautoxins into saxitoxins by thiols."Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters. 10巻. 1787-1789 (2000)

[Publications] Setsuko Sakamoto,Masaaki Kodama et al.: "Formation of intermediate conjugates in the reductive transformation of gonyautoxins to saxitoxins by thiol compounds"Fisheries Science. 66巻. 136-141 (2000)

[Publications] R.Groben,M.Kodama et al.: "16S rRNA Targeted Probes for the ldentification of Bacterial Strains lsolated from Cultures of the Toxic Dinoflagellate Alexandrium tamarense"Microb.Ecol.. 39巻. 186-196 (2000)

[Publications] Masaaki Kodama: "Seafood and Freshwater Toxins : Pharmacology, Physiology, and Detection (Botana,L.M.,Ed.) Part 6.Paralytic Shellfish Poisoning"Marcel Dekker,Inc. : New York, Basel. 798 (2000)

児玉正昭北里大学, 水産学部, 教授 (40050588)