2002 Fiscal Year Annual Research Report

微小管制御因子SCG10ファミリーの強制発現による視神経再生

Research Project

Project/Area Number	13558096
Research Institution	Osaka University
Principal Investigator	福田淳大阪大学, 医学系研究科, 教授 (90028598)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	三好智満大阪大学, 医学系研究科, 助手 (70314309) 井上徹大阪大学, 医学系研究科, 助手 (60263282) 澤井元大阪大学, 医学系研究科, 助教授 (20202103) 森望国立長寿医療研究センター, 分子遺伝学研究部, 部長 (00130394)
Keywords	網膜神経節細胞 / SCG10 / 軸索再生 / 微小管 / アデノウィルス / Bcl-2過剰発現マウス / アポトーシス / 海馬神経細胞
Research Abstract	本研究は、微小管の制御因子SCG10ファミリーを、アポトーシスを阻止した網膜神経節細胞に強制発現させることによって、in vitroで神経突起伸展に及ぼす作用を解明し、in vivoで視神経の再生を劇的に促進させることを目指している。昨年度に引き続き、SCG10ファミリー遺伝子をアデノウイルスベクターを用いて導入し、突起伸展効果を評価するための実験系の確立を目指した。具体的には以下の研究を行った。 (1)SCG10ファミリー遺伝子を神経特異的に導入するためのベクターコンストラクトの開発 (1)ElaE3-欠損型アデノウイルス5型ベクターのCMVプロモーター領域を神経特異的プロモーターに置き換えるため、SCG10の近位プロモーターにNRSE(element)を連結し、さらに、IRSE配列を介してLacZレポーター遺伝子とGFP(Green Fluorescent Protein)発現遺伝子を有するpXJ1CMV-LacZ/GFPに代替挿入した。 (2)このベクターにSCG10の微小管脱重合制御領域のリン酸化型および非リン酸化型コンストラクトを挿入し、293細胞に感染させて濃縮抽出した。 (3)培養海馬ニューロンおよび網膜神経節細胞にSCG10ファミリー遺伝子アデノウィルスベクターを感染させ、SCG10を強制発現させることに成功した。X-galおよび抗チューブリン抗体の免疫組織化学二重染色法によりSCG1ファミリー遺伝子を導入された神経突起を可視化したところ、導入細胞では顕著な突起の脱落・消失が認められた。 (2)成長円錐関連蛋白GAP43遺伝子を強制発現させるためのベクターコンストラクトを(1)〜(2)の方法で現在作成中である。 (3)Bcl-2過剰発現マウスの網膜から、予め逆行性に蛍光標識して置いた網膜神経節細胞をFACSで分離採取可能か否かを検討し、現在も継続中である。

Research Products

(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] Yakura T. et al.: "Effect of bcl-2 overexpression on establishment of ipsilateral retinocollicular projection in mice"Neuroscience. 110(4). 667-673 (2002)
[Publications] Inoue, T. et al.: "Bcl-2 overexpression does not enhance in vivo axonal regeneration of retinal ganglion cells after peripheral nerve transplantation in adult mice"J. Neurosci.. 22(11). 4468-4477 (2002)
[Publications] Kurimoto, T. et al.: "Apoptotic death of beta cells after optic nerve transection in adult cats"J. Neurosci.. (in press).
[Publications] 井上徹: "アポトーシス制御による成体網膜神経節細胞の生存・軸索再生"Molecular Medicine. 39. 129-136 (2002)
[Publications] 三好智満: "実験動物の視覚-視神経の再生と視覚伝導路の再構築-"比較眼科研究. 21. 115-121 (2002)
[Publications] 福田淳: "中枢神経系の再生と機能修復をめざして"脳の科学. 25. 229-233 (2003)
[Publications] 福田淳: "網膜・視神経の発生と再生"中山書店. 266 (2002)

2002 Fiscal Year Annual Research Report

微小管制御因子SCG10ファミリーの強制発現による視神経再生

Principal Investigator

福田 淳 大阪大学, 医学系研究科, 教授 (90028598)

Research Products

[Publications] Yakura T. et al.: "Effect of bcl-2 overexpression on establishment of ipsilateral retinocollicular projection in mice"Neuroscience. 110(4). 667-673 (2002)

[Publications] Inoue, T. et al.: "Bcl-2 overexpression does not enhance in vivo axonal regeneration of retinal ganglion cells after peripheral nerve transplantation in adult mice"J. Neurosci.. 22(11). 4468-4477 (2002)

[Publications] Kurimoto, T. et al.: "Apoptotic death of beta cells after optic nerve transection in adult cats"J. Neurosci.. (in press).

[Publications] 井上 徹: "アポトーシス制御による成体網膜神経節細胞の生存・軸索再生"Molecular Medicine. 39. 129-136 (2002)

[Publications] 三好 智満: "実験動物の視覚-視神経の再生と視覚伝導路の再構築-"比較眼科研究. 21. 115-121 (2002)

[Publications] 福田 淳: "中枢神経系の再生と機能修復をめざして"脳の科学. 25. 229-233 (2003)

[Publications] 福田 淳: "網膜・視神経の発生と再生"中山書店. 266 (2002)

福田淳大阪大学, 医学系研究科, 教授 (90028598)

[Publications] 井上徹: "アポトーシス制御による成体網膜神経節細胞の生存・軸索再生"Molecular Medicine. 39. 129-136 (2002)

[Publications] 三好智満: "実験動物の視覚-視神経の再生と視覚伝導路の再構築-"比較眼科研究. 21. 115-121 (2002)

[Publications] 福田淳: "中枢神経系の再生と機能修復をめざして"脳の科学. 25. 229-233 (2003)

[Publications] 福田淳: "網膜・視神経の発生と再生"中山書店. 266 (2002)