新規セレン定量法の開発と応用:セレン汚染軽減のための環境浄化植物の作出

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13660065
• Research Institution: Okayama University
• Principal Investigator: 下石 靖昭 岡山大学, 農学部, 教授 (70100948)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 村田 芳行 岡山大学, 農学部, 助教授 (70263621)
• Keywords: セレン / ピアセレノール / セレン耐性 / シロイヌナズナ

Research Abstract

新規セレン定量法の開発と応用に関して、以下の結果を得た。
1.ピアセレノールの定量
原子吸光法を用いた定量:測定が極めて簡便な炭素炉原子吸光法を用いて、ピアセレノールの定量を行なった。感度としては、以前申請者が確立したECD検出法以上の感度を得ることができなかった。
GC-MSを用いた定量:ECDに比べて利用しやすいGC-MSを用いて、ピアセレノールの定量分析を行なった。どのピアセレノールも、分子イオンピークを検出することができたが、しかし、再現性の良い、精度の高い結果は、得られなかった。
蛍光性ピアセレノールの設計と合成:フルオレセインまたはクマリンと1,2-ジアミノベンゼンが結合した化合物およびピアセレノール自身が蛍光を有する芳香族オルト-ジアミノ化合物の合成を行なっている。
2.セレン耐性植物の作出
EMSによる変異株の作製:EMS処理によって、M1種子を得、M1植物を生育させた。現在、M2種子収穫の時期に至っている。収穫後、スクリーニングを行なう予定である。
タギングによる変異株の作製:T-DNAタギング法により、T2種子を得、スクリーニングを近日中に行なう予定である。
セレン耐性株のスクリーニング法の確立:野生株を用いて、セレン感受性に関する種々の実験を行なった。中でも、セレンによる発芽抑制が顕著であり、操作が簡便であったため、発芽試験をスクリーニングに用いることに決定した。また、セレン酸または亜セレン酸の1次スクリーニング濃度は、500μMに決定した。