2001 Fiscal Year Annual Research Report

腎細胞癌発生におけるVHL遺伝子の分子生物学的役割・関与の解明に関する研究:ユビチキン化の新規標的蛋白質の同定

Research Project

Project/Area Number	13770891
Research Category	Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
Research Institution	International University of Health and Welfare
Principal Investigator	久米春喜国際医療福祉大学, 保健学部, 助教授 (10272577)
Keywords	VHL遺伝子 / 腎細胞癌 / ユビキチン化 / Two Hybrid System / クローニング / Exon2
Research Abstract	von Hippel Lindau病(VHL病)は中枢神経系Hemangioblastoma、網膜angioma、腎細胞癌など全身に腫瘍を多発する疾患である。原因遺伝子としてVHL遺伝子が近年クローニングされた。VHL遺伝子の変異は同時に散発性の腎細胞癌の約70%においても認められ、腎細胞癌の発生に深く関与している。またその遺伝子産物(以下pVHL)はいくつかのタンパクとcomplexを形成しubiquitin ligaseとして機能することが判明した。 VHL遺伝子は3つのエクソンよりなるが、pVHLはexon3に相当する部分が上記のcomplex形成に関与し、exon1および2に相当する部分の一部が基質を認識する部分であると考えられている。本研究ではVHL遺伝子exon2に的を絞り、yeastのtwo hybrid systemにより新規の遺伝子をスクリーニングし、同定・クローニングする。Exon2はubiquitin化の基質を認識する重要な部分であり、また実際に腎細胞癌でVHL遺伝子変異の多く認められる部分であるからである。初年度は、既にexon2の変異が同定されている腎細胞癌培養細胞(NHK124、東京大学医学部泌尿器科で樹立されているもの)よりcDNAライブラリーを作成し、Exon2が正常とされているアマシャムファルマシア社製の正常腎cDNAライブラリーとの比較(Two Hybrid Systemでの結果の比較)により、よりよい候補を検索した。しかしながら、Two Hybrid Systemでの反応が弱く、非特異的で、再現性がまったくなかったため、現在cDNAライブラリー再作成、およびBaitの部分(スクリーニングに使用するVHL遺伝子の一部分)の範囲を1種類でなく数種類に設定し直し、実験を進めている。一方で、私がフオローしていたVHL病患者のVHL遺伝子変異についてのスクリーニングで興味深い知見が得られた。Exon2に変異を有し、褐色細胞腫を合併したVHL病患者で、腎細胞癌では正常のAlleleがLossし、変異を有するAlleleが残っていたが、褐色細胞腫では変異を有する方のAlleleの脱落が認められた。したがってこの遺伝子変異は腎細胞癌発生に比較的重要な役割を果たしている可能性がある。今後、この変異をも含めたBaitの作成を進めたいと考えている。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Kume H, Takahashi S, Teramoto S, Isurugi K: "Risk factors for adult renal cell careinoma : a systemic review and implications for prevention"BJC Int. 88. 804
[Publications] Kume H, Teramoto S, Isurugi K: "In-vivo dedifferentiation of keratinocytes to epidermal stem cells"Lancet. 359. 528-529
[Publications] Takahashi Y, Nakatsuru Y, Zhang S, Shimizu Y, Kume H, Tanaka K, Ishikawa T: "Enhanced spontaneous and aflatoxin-induced liver tumorigenesis in xeroderma pigmentosum group A gene-deficient mice"Carcinogenesis. (in press).
[Publications] Kume H, Teramoto S, Kurimoto S, Minowada S, Isurugi K, Kitamura T: "'False'phaeochromocytoma with hypernoradrenalinuria"BJC Int. 88. 803
[Publications] Kume H, Tachikawa T, Teramoto S, Isurugi K, Kitamura T: "Bilateral testicular tumour in neurofibromatosis type 1"Lancet. 357. 395-396
[Publications] Teramoto S, Kume H, Fukuchi Y: "Thick mucus hypothesis in cystic fibrosis"Lancet. 357. 1203-1203

2001 Fiscal Year Annual Research Report

腎細胞癌発生におけるVHL遺伝子の分子生物学的役割・関与の解明に関する研究:ユビチキン化の新規標的蛋白質の同定

Principal Investigator

久米 春喜 国際医療福祉大学, 保健学部, 助教授 (10272577)

Research Products

[Publications] Kume H, Takahashi S, Teramoto S, Isurugi K: "Risk factors for adult renal cell careinoma : a systemic review and implications for prevention"BJC Int. 88. 804

[Publications] Kume H, Teramoto S, Isurugi K: "In-vivo dedifferentiation of keratinocytes to epidermal stem cells"Lancet. 359. 528-529

[Publications] Takahashi Y, Nakatsuru Y, Zhang S, Shimizu Y, Kume H, Tanaka K, Ishikawa T: "Enhanced spontaneous and aflatoxin-induced liver tumorigenesis in xeroderma pigmentosum group A gene-deficient mice"Carcinogenesis. (in press).

[Publications] Kume H, Teramoto S, Kurimoto S, Minowada S, Isurugi K, Kitamura T: "'False'phaeochromocytoma with hypernoradrenalinuria"BJC Int. 88. 803

[Publications] Kume H, Tachikawa T, Teramoto S, Isurugi K, Kitamura T: "Bilateral testicular tumour in neurofibromatosis type 1"Lancet. 357. 395-396

[Publications] Teramoto S, Kume H, Fukuchi Y: "Thick mucus hypothesis in cystic fibrosis"Lancet. 357. 1203-1203

久米春喜国際医療福祉大学, 保健学部, 助教授 (10272577)