2001 Fiscal Year Annual Research Report
ヒト卵巣表層上皮を用いた卵巣癌の腫瘍発生モデルの作製
Project/Area Number |
13770926
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Research Category |
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
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Research Institution | Kumamoto University |
Principal Investigator |
新田 愼 熊本大学, 医学部・附属病院, 助手 (00332875)
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Keywords | OSE / HPV E6 / HPV E7 / hTERT / 不死化細胞 / 卵巣癌 |
Research Abstract |
ヒトOSEのprimary cultureを2回継代した際に、改変pLXSN, pMSCVpuro virus vectorを用いて、HPV E6、E7、E6+E7、をtransfectionし、1回継代後、同じvectorを用いて、hTERTを導入した。TRA Passayにて、これらの細胞株にtelomerase活性を有することが確認された。 平成14年1月時点で、E6+E7は13継代、E6は10継代、E7は9継代培養されている。ImmunocytochemistryにてE6のみcytokeratine陰性、vimentin陽性、EMA陰性で、その他の細胞株はcytokeratine陽性、vimentin陽性、EMA陰性であった。これらの細胞株の中で、理論上染色体の安定する系は、E7である。E7細胞株、はcytokeratine陽性で細胞形態も部位により初代OSEと同じ敷石状配列を呈してきている。増殖速度が速く、今後、順調に継代可能であれば、染色体の安定したヒトOSE由来不死化細胞株が得られる可能性がある。今後は、不死化細胞株に癌遺伝子、変異癌抑制遺伝子を導入し、卵巣癌発生モデルの作成を行う。
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[Publications] M.Nitta, H.Katabuchi, et al.: "Characterization and Tumorigenicity of Human Ovarian Surface Epithelial Cells Immortalized by SV 40 Large T Antigen"Gynecologic Oncology. 81. 10-17 (2001)