分裂酵母におけるテロメア機能維持の分子メカニズムの解明

2002 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 13780551
• Research Institution: Kyoto University
• Principal Investigator: 加納 純子 京都大学, 生命科学研究科, 助手 (10323809)
• Keywords: ゲノム / 遺伝子 / テロメア / 染色体

Research Abstract

真核生物の染色体末端にはテロメアという構造体が存在しており、ゲノムの安定性において重要な機能を果たしている。昨年度までに我々は分裂酵母においてテロメア局在タンパク質Rap1を同定し、その機能について解析した。rap1破壊株において、テロメアDNAの著しい伸長、減数分裂期におけるテロメアクラスタリングの異常、テロメアサイレンシングの異常が観察された。このことから、Rap1は複数の役割を果たす多機能タンパク質であると考えられるが、具体的な作用機構は明らかにされていない。そこで、Rap1に結合する因子を単離するため、Rap1全長をbaitとしてtwo-hybridスクリーニングを行った。約5740000個のコロニーをスクリーニングし、Rap1結合タンパク質の候補として58クローンを得た。それらのうち、結合活性の強いものから順次解析を行った。Rip1(Rap1-interacting Protein 1)は、核内タンパク質であり、生育に必須であった。ChIP assayにより、Rip1タンパク質はテロメアに局在しないことが示された。Rip2およびRip4タンパク質は、Rap1のC末端領域に結合する活性を持っていた。ChIP assayにより、両タンパク質はテロメアに局在している可能性が示唆された。現在、rip2およびrip4遺伝子破壊株を作製し、表現型を観察することにより、これらの遺伝子の機能について解析している。

Research Products

• [Publications] Kanoh, J.: "The fission yeast spSet1p is a histone H3-K4 methyltransferase that functions in telomere maintenance and DNA repair in an ATM kinase Rad3-dependent pathway"J.Mol.Biol.. 326. 1081-1094 (2003)
• [Publications] Miyoshi, T.: "Telomeric DNA ends are essential for the localization of Ku at telomeres in fission yeast"J.Biol.Chem.. 278・3. 1924-1931 (2003)
• [Publications] 加納純子: "テロメア結合タンパク質によるテロメア制御"実験医学増刊号「ゲノム機能を担う核・染色体のダイナミクス」. 20・11. 1544-1549 (2002)