2014 Fiscal Year Annual Research Report
妊娠時疾患におけるアルギニンメチル基転移酵素・ＰＲＭＴ１の機能解析
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14J00428
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| Research Institution | University of Tsukuba |
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Principal Investigator |
石丸 友博 筑波大学, 生命環境科学研究科, 特別研究員(DC2)
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2014-04-25 – 2016-03-31
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| Keywords | タンパク質アルギニンメチル基転移酵素 / PRMT1 / 組織特異的欠損 / 血管内皮細胞 / 胎生致死 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
妊娠には、母体－胎児間の物質交換の要である胎盤の形成や、妊娠中の正常血圧の維持といった、「血管」の機能が特に重要である。そのため、血管機能の破綻は、重篤な妊娠時疾患を引き起こすと考えられるが、妊娠時における血管機能の制御因子は全く明らかにされていない。当研究室の先行解析において、ヒト臍帯静脈血管内皮細胞にて、タンパク質アルギニンメチル基転移酵素・PRMT1をノックダウンすると、管腔形成が促進されることが明らかとなり、血管内皮細胞において、PRMT1が血管の構造や機能の制御に重要である可能性が示されている。しかし、PRMT1の全身欠損マウスは、胎生初期に致死となることが報告されており、生体におけるPRMT1の機能は殆ど明らかにされていない。そこで、本研究では、血管内皮PRMT1の生理的な意義を明らかにするとともに、妊娠時疾患との関わりについて検討することを目的とした。そこで先ず、Cre-loxPシステムを用いて血管内皮細胞特異的にPRMT1を欠損するマウス（PRMT1-ECKO）を作製したところ、ホモのPRMT1-ECKOマウスは、胎生14日目から15日目にかけて致死になることが判明した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
本研究は、タンパク質アルギニンメチル基転移酵素・PRMT1に関して、血管内皮細胞における生理機能を明らかにするとともに、妊娠時疾患との関わりについて検討することを目的としている。平成26年度の解析から、PRMT1-ECKOマウスが、胎生15日までに致死となることを明らかにした。このことは血管内皮細胞において、PRMT1が正常な胎仔発生に重要であることを示している。胎仔の正常発育には、胎仔自体の血管形成に加えて、胎盤の血管リモデリングも重要であり、これら妊娠時イベントへの血管内皮PRMT1の関与が考えられる。昨年度の成果は、これまで未知であったPRMT1の生理的な意義を示す重要な知見である。
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| Strategy for Future Research Activity |
昨年度は、PRMT1-ECKOマウスが胎生致死となることを明らかにした。そこで本年度は、PRMT1-ECKOマウスの死亡原因を特定するため、胎仔や胎盤における詳細な血管の構造解析を行う。その際に、多光子顕微鏡を用いた胎仔や胎盤全体の血管構造の３次元構築にチャレンジする。既に昨年度、Cre発現部位で蛍光が緑色から赤色へと変わるCreレポーターマウス（R26GRRマウス）を導入し、PRMT1-ECKOマウスと交配することでR26GRR/PRMT1-ECKOマウスの作製に成功している。そこで、このマウスを用いて、血管内皮PRMT1の有無による血管構造の違いを評価する予定である。また、組織病理学的・生化学的解析を行うことにより、胎仔発生期における血管内皮PRMT1の生理的意義について明らかにする。
血管内皮PRMT1と妊娠時疾患との関わりについては、PRMT1-ECKOマウスが致死となったため、当初の計画通り妊娠高血圧マウスにおける血管内皮PRMT1の欠損に向けて、薬剤投与によってPRMT1が欠損する誘導型血管内皮PRMT1欠損（PRMT1-iECKO）マウスを用いることにした。これまでに、妊娠高血圧マウスの作製に必要なヒトアンジオテンシノーゲン過剰発現（hAG）マウス、及び、ヒトレニン過剰発現（hRN）マウスに対し、PRMT1-iECKOマウスを交配することにより、PRMT1-iECKO/hAGマウス、及び、PRMT1-iECKO/hRNマウスの作製が完了している。今年度は、これらマウスを交配することで、PRMT1-iECKO/妊娠高血圧マウスを作製し、胎仔・胎盤の病態解析や、母体の病態変化を検討することで、血管内皮細胞におけるPRMT1の機能と妊娠時疾患との関連を明らかにする予定である。
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Research Products
(2 results)
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[Presentation] 妊娠高血圧マウスに対する複数の降圧剤投与による病態改善効果2014
Author(s)
石丸友博、石田純治、中村匠子、橋本美涼、松倉頼、Baasanjav Altansarnai、Xu Haojun、水上早瀬、権哲源、國田智、杉山文博、八神健一、深水昭吉
Organizer
第5回 Molecular Cardiovascular Conference II
Place of Presentation
兵庫県 神戸市 神戸ベイシェラトンホテル＆タワーズ
Year and Date
2014-09-05 – 2014-09-06
