2003 Fiscal Year Annual Research Report
多機能アダプター蛋白質GGAの細胞内小胞輸送における役割
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15209002
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Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
中山 和久 京都大学, 薬学研究科, 教授 (40192679)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
申 惠媛 金沢大学, 薬学部, 助手 (10345598)
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| Keywords | GGA / GATドメイン / ユビキチン / 小胞輸送 / X線結晶構造解析 |
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| Research Abstract |
GGAは、様々なタンパク質と相互作用することにより,マンノース6リン酸受容体(M6PR)等のトランスゴルジネットワーク(TGN)からエンドソームへの輸送を調節するクラスリンのアダプタータンパク質である。哺乳動物には、GGA1,GGA2,GGA3の3種類のアイソフォームが存在する。
本研究では、GGAに関して以下のことを明らかにした。
1.GGAのGATドメインに低分子量GTPaseのARFが結合することを明らかにした。さらに、突然変異体を用いた解析から、ARFはGATドメインのN末端側のサブドメイン(N-GATサブドメイン)に結合する可能性を示した。
2.GGA1のGATドメインとARFの複合体のX線結晶構造解析を行ない、GATドメインとARFの結合様式を明らかにし、突然変異体を用いた解析と矛盾しないことを示した。
3.GGAのGATドメインにユビキチンが結合し、GGA自体がユビキチン化されることを発見した。また、ユビキチンの結合がGGAのユビキチン化に必須であることを示した。
4.突然変異体を用いた解析とX線結晶構造解析のデータを考えあわせることにより、ユビキチンはGATドメインのC末端側のサブドメイン(C-GATサブドメイン)に結合する可能性を示した。
5.ARFとユビキチンは、GATドメインに同時に結合しうることを示した。
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Research Products
(5 results)
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[Publications] Shiba, Y., et al.: "GAT(GGA and Tom1) domain responsible for ubiquitin binding and ubiquitination"J.Biol.Chem.. 279. 7105-7111 (2004)
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[Publications] Shakoori, A., et al.: "Identification of a five-pass transmembrane protein family localizing in the Golgi apparatus and the ER."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 312. 850-857 (2003)
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[Publications] Matsukawa, J., et al.: "Role of ADP-ribosylation factor 6(ARF6) in gastric acid secretion"J.Biol.Chem.. 278. 36470-36475 (2003)
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[Publications] Wakasugi, M., et al.: "Predominant expression of the short form of GGA3 in human cell lines and tissues"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 306. 687-692 (2003)
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[Publications] Shiba, T., et al.: "Molecular mechanism of membrane recruitment of GGA by ARF in lysosomal protein transport"Nat.Struct. Biol.. 10. 368-393 (2003)
