レシピエント骨随細胞移植によるドナー腎血管内皮細胞再生と血管内皮細胞キメラ誘導

2003 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 15390486
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• Research Institution: Niigata University
• Principal Investigator: 齋藤 和英 新潟大学, 医歯学総合病院, 講師 (20262438)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 追手 巍 新潟大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (60018744) ; 高橋 公太 新潟大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (90101857)
• Keywords: 腎微小循環障害 / 腎虚血灌流障害 / 血管内皮細胞障害 / 単離腎潅流実験系 / 実時間型生体顕微鏡 / 免疫組織学

Research Abstract

腎障害モデルの確立と腎血行動態、腎血管内皮細胞障害の検討方法の確立
1.生理学的手法による腎微小循環障害の解析
ラットにおいて虚血再灌流障害、カルシニューリンインヒビター腎障害、抗血管内皮細胞抗体による各種腎障害モデルを作成し、今回設置したランゲンドルフ単離腎潅流液実験機器を用いて、単離腎の潅流実験を行い、潅流液中の血管作動性物質(レニン、アンギオテンシン、エンドセリン、一酸化窒素)、逸脱酵素(LDH,NAG,β2MG)を定量的に解析する方法を確立した。これにより腎微小循環障害の腎血行動態(腎血管抵抗、糸球体濾過率)の検討が可能になった。
2.実時間生体顕微鏡を用いたreal time腎微小循環障害の検討
腎研究施設、機能制御学分野に設置されているCSU-10を使用し、上記のモデルにおける糸球体係蹄、傍尿細管毛細血管の血流障害を定量的に検討する手法を確立した。
本段階の研究は他の腎障害モデルで一部既に実施、報告済みである。
3.病理組織学・免疫組織学的方法による腎微小循環障害の解析
上記モデル腎の病理組織学、免疫組織学的解析を行い、腎血管内皮細胞障害の程度を、通常のHE,PAM,PAS染色による病理組織学的解析、免疫蛍光抗体法、免疫組織化学染色による血管内皮細胞マーカー、血管再生に関与するサイトカイン、増殖因子、増殖因子受容体(FactorVIII,thrombomodulin,VEGF,PAF,PDGF,Flt-1)を解析する系を確立した。

Research Products

• [Publications] 諏訪通博: "実時間型共焦点レーザー走査生体顕微鏡を用いたEnhanced Green Fluorescent Protein(EGFP)陽性細胞の同定法"新潟医学会雑誌. 118・12(印刷中). (2004)
• [Publications] Suwa M, et al.: "Regeneration of renal microvasculature by bone marrow derived endothelial cells following ischemia-reperfusion injury(IRI)"Journal of American Society of Nephrology. 14. 60A (2003)
• [Publications] Kawamura K, et al.: "Turbulence of glomerular hemodynamics involved in the progressive glomerulosclerosis"Journal of American Society of Nephrology. 14. 605A (2003)