食品抗原・機能性食品成分摂取による小腸上皮内リンパ球の遺伝子発現変化の解析

2003 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 15580101
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 戸塚 護 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 寄付講座教員(常勤形態) (70227601)
• Keywords: 小腸上皮内リンパ球 / 脾臓T細胞 / DNAマイクロアレイ / 遺伝子発現の網羅的解析 / グランザイム / 腸管免疫

Research Abstract

腸管上皮内に存在するT細胞様の細胞である小腸上皮内リンパ球(IEL)に注目し、DNAマイクロアレイの手法を用いて遺伝子発現の観点からIELの特性について検討を行った。CD4陽性IELと脾臓CD4陽性T細胞との間で異なる発現を示す遺伝子に由来するDNA断片(約1200種)を用いて、スライドガラスを用いたDNAマイクロアレイチップを作製した。IELはT細胞レセプター(αβ型、γδ型)や細胞表面分子(CD4分子、CD8ααホモダイマー、CD8αβヘテロダイマー)の発現の違いにより、主に5つのサブセットに分類できる。上記DNAマイクロチップを用いて、脾臓CD4陽性T細胞と各IELサブセットの間の遺伝子発現を比較解析した。すなわち、BALB/cマウスからIELの各サブセットおよび脾臓CD4陽性T細胞、脾臓CD8陽性T細胞を、セルソーターを用いて精製した。それぞれの細胞からRNAを抽出した後、蛍光標識したcDNAプローブを作製し、DNAマイクロアレイ解析を行った。その結果、他の細胞に対するアポトーシス誘導能を示すグランザイムAはIELのいずれのサブセットにおいても、CD4陽性あるいはCD8陽性の脾臓T細胞と比較して著しく発現が高いことが明らかとなった。しかし、CD4陽性IELサブセットにおける発現は、他のIELサブセットと比べると顕著に小さいものであった。また、全体的な遺伝子の発現パターンの解析から、IELサブセットは大きく3つのグループに分類できることが示唆された。

Research Products

• [Publications] T.Oida, et al.: "CD4^+CD25^- T cells that express latency-associated peptide on the surface suppress CD4^+ colitis by a TGF-β-dependent mechanism."Journal of Immunology. 170. 2516-2522 (2003)
• [Publications] M.Goto, et al.: "Antigen feeding enhances frequency and antigen-specific proliferation ability of intraepithelial cell receptor transgenic mice."Bioscience, Biotechnology, Biochemistry. 67. 1223-1229 (2003)
• [Publications] T.Yoshida, et al.: "Interleukin 12 and CD86 regulate T helper type 1 and type 2 development induced by various the antigen presentation by Peyer's patch and spleen cells."Cytotechnology. (印刷中). (2004)
• [Publications] S.Nagafuchi, et al.: "Dendritic cells from spleen, mesenteric lymph node and Peyer's patch can induce both production naive CD4^+T cells in their primary culture, depending on antigen doses."Cytotechnology. (印刷中). (2004)
• [Publications] 戸塚護: "免疫力を高めアレルギーを抑える食生活 -ホールグレインの有用性-"ホールグレイン協会学術論文集. 3. 5-8 (2003)
• [Publications] 戸塚 護(分担執筆): "食品とからだ 免疫・アレルギーのしくみ(上野川修一編)"(株)朝倉書店(東京). 194 (2003)
• [Publications] S.Kaminogawa, M.Totsuka: "Advanced Dairy Chemistry-Vol.1. Proteins, 3rd Edition (Eds.P.F.Fox, P.L.H.McSweeney)"Kluwer Academic/Plenum Publishers (NewYork, NY, USA). 1346 (2003)