2015 Fiscal Year Annual Research Report
オートファジーにおける膜形成過程の統合的理解と制御剤探索
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15H04371
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
濱崎 万穂 大阪大学, 生命機能研究科, 准教授 (30455216)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | オートファジー |
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| Outline of Annual Research Achievements |
A) 飢餓誘導により起こるオートファジーの分子機構の解明 オートファゴソームの形成場が小胞体・ミトコンドリア接触部位(MAM)であることを明らかいしたが、他のAtgやオルガネラとの関係のより詳細な解析を行った。主に光学顕微鏡を駆使して行い、最上流因子らも飢餓応答でMAMに局在することが明らかになった。
B) 小胞輸送に関わる因子の中でオートファジーに関わる因子を探索する。イメージングベースでのスクリーニング系を立ち上げsiRNA スクリーニングを実施し、候補因子が幾つかみつかった。セカンダリースクリーニング、サードスクリーニングを実施し候補を絞り、現在フェノタイプを観察している。最上流因子の局在に関与する可能性をもつ因子が現在候補となっている。
C) 飢餓時のMAMのプロテオミクス解析 なぜオートファゴソームがMAMで形成されるかに迫るため生化学的にMAM画分を取りプロテオミクス解析を行っている。MAM画分の精製にかなり時間を費やしたがようやくコンスタントに同じ結果をだせる精度にもってこれた。現在一回目の解析がおわり候補を絞っている。同時に２度目３度目のプロテオミクス解析を行っている最中である。
D) オートファジーに優位性の高い薬剤の探索 大阪大学がもつ薬剤ライブラリーを用い、イメージングベースの薬剤スクリーニングを開始した。候補がいくつかとれてきている状態である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
新たなオートファジーに関与する因子の可能性をもつものが取れており、またそれが上流因子の局在に必須な可能性があり、期待が高まる。
薬剤スクリーニングやプロテオミクスに関しては今後検証が必要であり、候補が絞れることが期待される。
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| Strategy for Future Research Activity |
取れている候補因子が本当にオートファジーに必要か詰めていく。またMAM関連因子や薬剤は現在あがっている候補の２次、３次スクリーニングを行い候補を絞る。イメージング解析による上流因子とMAMの関係は揃い次第論文にする予定である。
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Research Products
(11 results)
