2016 Fiscal Year Annual Research Report
アルドステロン合成細胞(APC)を探して:高血圧症臓器障害の新たな機序の解明
Project/Area Number |
15H04711
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Research Institution | Tohoku University |
Principal Investigator |
笹野 公伸 東北大学, 医学系研究科, 教授 (50187142)
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Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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Keywords | 副腎 / ステロイド / アルドステロン / 免疫組織化学 / 高血圧 / 病理学 / 次世代シークエンス |
Outline of Annual Research Achievements |
原発性アルドステロン症の臨床診断にて手術摘除された副腎組織の中で、腫瘍性病変が認められない症例に対して、パラフィン包埋組織より連続切片を作製し、HE染色による形態学的評価、アルドステロン合成酵素(CYP11B2)などのステロイド合成酵素の発現パターンの解析を行った。これら非腫瘍性病変の病理組織診断は通常のHE染色のみでは困難であるが、CYP11B2陽性細胞の球状層における発現動態がびまん性に分布するか、局所に結節状に分布するかにより、大きく2つの病型に分布する事を今回初めて示す事が出来た。また、これら症例の連続切片よりDNAを抽出し 次世代シークエンサーを用いて、近年、アルドステロン過剰産生に関与すると報告されている各種イオンチャネルをコードする遺伝子(KCNJ5、ATP1A1、ATP2B3、CACNA1Dなど)の体細胞変異の有無を解析した。 その結果、CYP11B2陽性細胞が球状層局所に結節状に分布している症例の一部において、今まで APAでのみ報告されていたカリウムチャネルをコードするKCNJ5遺伝子の体細胞変異を新たに発見する事が出来た。この結果からAPAの起源となり得る病変の可能性を初めて今回の検討で示す事が出来た。更にAPAの発生には塩分摂取や局所アルドステロン濃度といった環境因子が強く影響している可能性が示唆されており、これら環境因子によって誘導される酵素やタンパクの発現量についても検討を加えると同時にアルドステロン合成に関与する遺伝子の発現を制御するmicroRNA等のepigeneticな要因についてもこれから検討を更に加える予定である。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
Ⅰ.剖検で得られた正常副腎及び手術検体で得られたAPA症例でAPCを同定する。: 剖検例において、APCは約30%で確認される事を初めて証明した。更にこれらAPCは加齢と共に増加する事も初めて発見し、現在peer review 誌に投稿中である。 Ⅱ.これらAPCにおけるアルドステロン合成動態の詳細をその制御機構を含めて明らかにする。:APCおよびAPAでのカルシウムチャネル関係のタンパク質発現動態との比較検討を行った。また、アルドステロン過剰産生に関与する遺伝子の体細胞変異の頻度をAPCおよびAPA、さらにはAPAの前駆病変となり得る病変についてもこれらの遺伝子の体細胞変異の頻度を比較検討した。引き続き培養細胞でアルドステロン合成と関係がある可能性があるmicroRNAを現在同定しているところである。 Ⅲ.正常副腎皮質、APAでのAPCの病態意義を種々の臨床病理学的因子と相関させて解明する。:正常副腎皮質では加齢との相関を示し、血圧とは有意の相関はない事を認めた。高血圧症例と非高血圧症例におけるAPCでアルドステロン過剰産生に関係する遺伝子の体細胞変異の頻度が異なる事が示されたと同時にAPCの個数や皮質に対する面積比が異なる事についても証明した。これらのAPCの一つがAPAの前駆病変となり得るかについて、epigeneticな要因や食塩摂取等の環境因子によって誘導されるタンパク質や酵素の発現について現在評価中である。 Ⅳ.得られた結果が高血圧症やPAの新しい診断・治療方法の開発に結びつけられる可能性を模索する。:摘出された副腎組織においてCYP11B2の免疫組織化学は病型分類に非常に重要であり、術後の治療法の選択にも関与する事が示された。引き続き術前診断に有用なバイオマーカーの探索を行う予定である。
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Strategy for Future Research Activity |
1. 正常副腎皮質球状層でアルドステロンを合成している細胞とそうでない細胞間で、形態学的な差異があるのかを電子顕微鏡を用いた超微形態学的観察により検討する。また、KCNJ5陽性のAPAは形態学的に淡明な膨化した細胞質を有する細胞により構成される事が知られており、この細胞の超微形態学的観察により、副腎皮質の球状層に近い細胞なのか束状層に近い細胞なのかを比較検討し、APAの発生母地に迫る。 2. 食塩過剰摂取により誘導される酵素やタンパク質の発現量の差異を原発性アルドステロン症の副腎組織および正常副腎組織において比較する。また、培養細胞を用いてこれらの遺伝子の発現量とアルドステロン合成に関与する酵素の発現量との相関性を検討する。 3. 2.の遺伝子の発現を制御する microRNAやカルシウムチャネルやカリウムチャネルをコードする遺伝子の発現を制御するmicroRNA が発現しているのかどうかを、APA やCYP11B2陽性のアルドステロン合成細胞、陰性の球状層細胞を顕微鏡下で単離し検討する。 4. 2.や3.で同定された遺伝子や microRNAの発現を培養細胞において減弱させ、アルドステロン合成に関与する酵素の発現量の推移を解析する。
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Research Products
(103 results)
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[Journal Article] Activation of the Hypoxia Inducible Factor 1α Subunit Pathway in Steatotic Liver Contributes to Formation of Cholesterol Gallstones.2017
Author(s)
Asai Y, Yamada T, Tsukita S, Takahashi K, Maekawa M, Honma M, Ikeda M, Murakami K, Munakata Y, Shirai Y, Kodama S, Sugisawa T, Chiba Y, Kondo Y, Kaneko K, Uno K, Sawada S, Imai J, Nakamura Y, Yamaguchi H, Tanaka K, Sasano H, Mano N, Ueno Y, Shimosegawa T, Katagiri H.
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Journal Title
Gastroenterology.
Volume: 11
Pages: 印刷中
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Histopathological classification of cross-sectional image negative hyperaldosteronism.2017
Author(s)
Yamazaki Y, Nakamura Y, Omata K, Ise K, Tezuka Y, Ono Y, Morimoto R, Nozawa Y, Gomez-Sanchez CE, Tomlins SA, Rainey WE, Ito S, Satoh F, Sasano H.
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Journal Title
J Clin Endocrinol Metab.
Volume: 印刷中
Pages: 印刷中
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] A case of primary aldosteronism caused by unilateral multiple adrenocortical micronodules presenting as muscle cramps at rest: The importance of functional histopathology for identifying a culprit lesion.2017
Author(s)
Ito A, Yamazaki Y, Sasano H, Matsubara D, Fukushima N, Tamba M, Tabata K, Ashizawa K, Takei A, Koizumi M, Sakuma Y, Sata N, Oshiro H.
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Journal Title
Pathol Int.
Volume: 67
Pages: 214-221
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Virilism and Ectopic Expression of HSD17B5 in Mature Cystic Teratoma.2017
Author(s)
Kawaguchi Y, Mizuno H, Horikawa M, Kano M, Yamada K, Yamakawa F, Maekawa T, Yamazaki Y, McNamara KM, Sasano H, Hayashi M.
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Journal Title
Tohoku J Exp Med.
Volume: 241
Pages: 125-129
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Randomized trial of aromatherapy versus conventional care for breast cancer patients during perioperative periods.2017
Author(s)
Tamaki K, Fukuyama AK, Terukina S, Kamada Y, Uehara K, Arakaki M, Yamashiro K, Miyashita M, Ishida T, McNamara KM, Ohuchi N, Tamaki N, Sasano H.
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Journal Title
Breast Cancer Res Treat.
Volume: 162
Pages: 523-531
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Somatic KCNJ5 mutation occurring early in adrenal development may cause a novel form of juvenile primary aldosteronism.2017
Author(s)
Tamura A, Nishimoto K, Seki T, Matsuzawa Y, Saito J, Omura M, Gomez-Sanchez CE, Makita K, Matsui S, Moriya N, Inoue A, Nagata M, Sasano H, Nakamura Y, Yamazaki Y, Kabe Y, Mukai K, Kosaka T, Oya M, Suematsu S, Nishikawa T.
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Journal Title
Mol Cell Endocrinol.
Volume: 441
Pages: 134-139
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Hexokinase 2 in colorectal cancer: a potent prognostic factor associated with glycolysis, proliferation and migration.2017
Author(s)
Katagiri M, Karasawa H, Takagi K, Nakayama S, Yabuuchi S, Fujishima F, Naitoh T, Watanabe M, Suzuki T, Unno M, Sasano H.
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Journal Title
Histol Histopathol.
Volume: 32
Pages: 351-360
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] The presence and impact of estrogen metabolism on the biology of triple-negative breast cancer.2016
Author(s)
McNamara KM, Oguro S, Omata F, Kikuchi K, Guestini F, Suzuki K, Yang Y, Abe E, Hirakawa H, Brown KA, Takanori I, Ohuchi N, Sasano H.
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Journal Title
Breast Cancer Res Treat.
Volume: 161
Pages: 213-227
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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[Journal Article] Histopathological analysis of spontaneous large necrosis of adrenal pheochromocytoma manifested as acute attacks of alternating hypertension and hypotension: a case report.2016
Author(s)
Ohara N, Uemura Y, Mezaki N, Kimura K, Kaneko M, Kuwano H, Ebe K, Fujita T, Komeyama T, Usuda H, Yamazaki Y, Maekawa T, Sasano H, Kaneko K, Kamoi K.
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Journal Title
J Med Case Rep.
Volume: 10
Pages: 279
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Pancreatic solitary fibrous tumor causing ectopic adrenocorticotropic hormone syndrome.2016
Author(s)
Murakami K, Nakamura Y, Felizola SJ, Morimoto R, Satoh F, Takanami K, Katakami H, Hirota S, Takeda Y, Meguro-Horike M, Horike S, Unno M, Sasano H.
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Journal Title
Mol Cell Endocrinol.
Volume: 436
Pages: 268-273
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] A Novel Mutation in the type Iα Regulatory Subunit of Protein Kinase A (PRKAR1A) in a Cushing's Syndrome Patient with Primary Pigmented Nodular Adrenocortical Disease.2016
Author(s)
Mineo R, Tamba S, Yamada Y, Okita T, Kawachi Y, Mori R, Kyo M, Saisho K, Kuroda Y, Yamamoto K, Furuya A, Mukai T, Maekawa T, Nakamura Y, Sasano H, Matsuzawa Y.
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Journal Title
Intern Med.
Volume: 55
Pages: 2433-2438
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Immunohistochemical analysis of insulin-like growth factor 1 and its receptor in sporadic schwannoma/peripheral nerve sheath tumour.2016
Author(s)
Matsubara F, Katabami T, Asai S, Ariizumi Y, Maeda I, Takagi M, Keely MM, Ono K, Maekawa T, Nakamura Y, Tanaka Y, Sasano H.
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Journal Title
J Int Med Res.
Volume: 44
Pages: 662-672
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Expression of steroidogenic enzymes and their transcription factors in cortisol-producing adrenocortical adenomas: immunohistochemical analysis and quantitative real-time polymerase chain reaction studies.2016
Author(s)
Kubota-Nakayama F, Nakamura Y, Konosu-Fukaya S, Azmahani A, Ise K, Yamazaki Y, Kitawaki Y, Felizola SJ, Ono Y, Omata K, Morimoto R, Iwama N, Satoh F, Sasano H.
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Journal Title
Hum Pathol.
Volume: 54
Pages: 165-173
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Immunohistochemical analysis of steroidogenic enzymes in ovarian-type stroma of pancreatic mucinous cystic neoplasms: Comparative study of subepithelial stromal cells in intraductal papillary mucinous neoplasms of the pancreas.2016
Author(s)
Ishida K, Sasano H, Moriya T, Takahashi Y, Sugimoto R, Mue Y, Murakami K, Fujishima F, Nakamura Y, Morikawa T, Motoi F, Suzuki T, Unno M, Sugai T.
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Journal Title
Pathol Int.
Volume: 66
Pages: 281-287
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Comparison of the methods for measuring the Ki-67 labeling index in adrenocortical carcinoma: manual versus digital image analysis.2016
Author(s)
Yamazaki Y, Nakamura Y, Shibahara Y, Konosu-Fukaya S, Sato N, Kubota F, Oki Y, Baba S, Midorikawa S, Morimoto R, Satoh F, Sasano H.
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Journal Title
Hum Pathol.
Volume: 53
Pages: 41-50
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] A Case of Cushing's Syndrome with Multiple Adrenocortical Adenomas Composed of Compact Cells and Clear Cells.2016
Author(s)
Asakawa M, Yoshimoto T, Ota M, Numasawa M, Sasahara Y, Takeuchi T, Nakano Y, Oohara N, Murakami M, Bouchi R, Minami I, Tsuchiya K, Hashimoto K, Izumiyama H, Kawamura N, Kihara K, Negi M, Akashi T, Eishi Y, Sasano H, Ogawa Y.
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Journal Title
Endocr Pathol.
Volume: 27
Pages: 136-141
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Intratumoral estrogen production and actions in luminal A type invasive lobular and ductal carcinomas.2016
Author(s)
Takagi M, Miki Y, Miyashita M, Hata S, Yoda T, Hirakawa H, Sagara Y, Rai Y, Ohi Y, Tamaki K, Ishida T, Suzuki T, Ouchi N, Sasano H.
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Journal Title
Breast Cancer Res Treat.
Volume: 156
Pages: 45-55
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Renal Resistive Index Predicts Postoperative Blood Pressure Outcome in Primary Aldosteronism.2016
Author(s)
Iwakura Y, Ito S, Morimoto R, Kudo M, Ono Y, Nezu M, Takase K, Seiji K, Ishidoya S, Arai Y, Funamizu Y, Miki T, Nakamura Y, Sasano H, Satoh F.
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Journal Title
Hypertension.
Volume: 67
Pages: 654-660
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Cushing Syndrome Due to ACTH-Secreting Pheochromocytoma, Aggravated by Glucocorticoid-Driven Positive-Feedback Loop.2016
Author(s)
Sakuma I, Higuchi S, Fujimoto M, Takiguchi T, Nakayama A, Tamura A, Kohno T, Komai E, Shiga A, Nagano H, Hashimoto N, Suzuki S, Mayama T, Koide H, Ono K, Sasano H, Tatsuno I, Yokote K, Tanaka T.
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Journal Title
J Clin Endocrinol Metab.
Volume: 101
Pages: 841-846
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Intratumoral heterogeneity of steroidogenesis in aldosterone-producing adenoma revealed by intensive double- and triple-immunostaining for CYP11B2/B1 and CYP17.2016
Author(s)
Nakamura Y, Kitada M, Satoh F, Maekawa T, Morimoto R, Yamazaki Y, Ise K, Gomez-Sanchez CE, Ito S, Arai Y, Dezawa M, Sasano H.
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Journal Title
Mol Cell Endocrinol.
Volume: 442
Pages: 57-63
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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[Journal Article] Extraordinarily high aldosterone, 901.0 ng/dL, in a patient with primary aldosteronism: an insight into the underlying mechanism.2016
Author(s)
Okubo Y, Sato Y, Nakasone Y, Shirotori K, Oguchi K, Matsushita T, Nishikawa T, Yamazaki Y, Sasano H, Komtasu M, Yamauchi K, Aizawa T.
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Journal Title
Endocr J.
Volume: 63
Pages: 127-133
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] A case of bilateral aldosterone-producing adenomas differentiated by segmental adrenal venous sampling for bilateral adrenal sparing surgery.2016
Author(s)
Morimoto R, Satani N, Iwakura Y, Ono Y, Kudo M, Nezu M, Omata K, Tezuka Y, Seiji K, Ota H, Kawasaki Y, Ishidoya S, Nakamura Y, Arai Y, Takase K, Sasano H, Ito S, Satoh F.
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Journal Title
J Hum Hypertens.
Volume: 30
Pages: 379-385
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Presentation] OLFM4 immunolocalization in breast carcinoma as a potent prognostic predictor2017
Author(s)
Akifumi Mayama, Hiroyoshi Suzuki, Kiyoshi Takagi, Yoshiaki Onodera, Yasuhiro Miki, Takanori Watanabe, Kazuhiro Sakamoto, Ryuichi Yoshida, Takanori Ishida, Hironobu Sasano, Takashi Suzuki
Organizer
The 2017 Japan-NIH Joint Symposium on Advances in Biomedical Research and Disease
Place of Presentation
Seiryo Auditorium(Tohoku University,Sendai Japan)
Year and Date
2017-02-15 – 2017-02-17
Int'l Joint Research
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[Presentation] Hypomethylation of the Pomc Promoter in ACTH Producing Pheochromocytoma2016
Author(s)
Ikki Sakuma, Seiichirou Higuchi, Masanori Fujimoto, Tomoko Takiguchi, Akitoshi Nakayama, Ai Tamura, Takashi Kohno, Eri Komai, Akina Shiga, Hidekazu Nagano, Naoko Hashimoto, Sawako Suzuki, Takafumi Mayama, Hisashi Koide, Katsuhiko Ono, Hironobu Sasano, Ichiro Tatsuno, Koutaro Yokote, Tomoaki Tanaka
Organizer
ENDO2016
Place of Presentation
Boston (USA)
Year and Date
2016-04-01 – 2016-04-04
Int'l Joint Research
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[Presentation] A Case of Cardiac Myxoma and Subclinical Cushing's Syndrome Associated with a Novel Mutation in Fumarate Hydratase (FH) Gene and the Significance of Mutation in FH Gene in Adrenal Tumors2016
Author(s)
Kentaro Suda, Hidenori Fukuoka, Miki Mukai, Katsuhiko Ono, Genzo Iguchi, Yukiko Odake, Kenichi Yoshida, Ryusaku Matsumoto, Hironori Bando, Hitoshi Nishizawa, Michiko Takahashi, Hironobu Sasano, Wataru Ogawa, Yutaka Takahashi
Organizer
ENDO2016
Place of Presentation
Boston (USA)
Year and Date
2016-04-01 – 2016-04-04
Int'l Joint Research
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[Presentation] New Innovative Rapid Assay of Plasma Aldosteorne Concentration and Active Renin Concentration Are Effective for Diagnosing Primary Aldosteronism2016
Author(s)
Yoshikiyo Ono, Ryo Morimoto, Yuta Tezuka, Kei Omata, Masahiro Nezu, Yasuhiro Igarashi, Yoshitsugu Iwakura, Masataka Kudo, Kazumasa Seiji, Kei Takase, Yuto Yamazaki, Yasuhiro Nakamura, Hironobu Sasano, Sadayoshi Ito, Fumitoshi Satoh
Organizer
ENDO2016
Place of Presentation
Boston (USA)
Year and Date
2016-04-01 – 2016-04-04
Int'l Joint Research
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