2015 Fiscal Year Annual Research Report
非自己排除機構の解析とステルスＴ細胞作成による抗原受容体改変Ｔ細胞療法の汎用化
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15H04918
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| Research Institution | Mie University |
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Principal Investigator |
池田 裕明 三重大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (40374673)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | がん免疫療法 / 細胞療法 / 遺伝子治療 / 非自己細胞 / ゲノム編集 / siRNA / TCR / MHC |
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| Outline of Annual Research Achievements |
1.輸注細胞のMHC発現抑制技術の開発：非自己細胞を輸注した際の宿主免疫系による拒絶を原弱させる目的で、輸注細胞のβ2ミクログロブリンの発現を抑制し、T細胞のMHC class IをMHCのタイプに関わらずに発現低下させることを目指した。ヒトT細胞のMHC class I発現抑制を可能する為に、ヒトβ2ミクログロブリンに対するCRISPR-Cas9システムのコンストラクトを作成した。ガイドRNAを２種作成し、プラスミドベクターに組み込むことに成功した。
2.受容体改変T細胞を用いた、非自己排除評価系の確立と非自己排除因子の解明：重度免疫不全NOGマウスに受容体遺伝子改変ヒトリンパ球を輸注するインビボ評価系を用いた。NY-ESO-1抗原陽性のヒトメラノーマ細胞株を接種したNOGマウスに内因性TCR遺伝子発現抑制レトロウイルスベクターにより非自己反応性を減弱させつつNY-ESO-1特異的TCR遺伝子を導入したヒトT細胞を輸注した。腫瘍細胞の拒絶にはCD8陽性T細胞が関与すること、移植片対宿主病（GVHD）の発症にはCD4陽性T細胞とCD8陽性T細胞の療法が関わることが明らかとなった。GVHDはCD4陽性T細胞とCD8陽性T細胞いずれの場合も内因性TCR遺伝子発現抑制レトロウイルスベクターにより非自己反応性を減弱させると発症が抑制可能であることが明らかとなった（2015ヨーロッパがん免疫療法学会(CIMT)総会他にて発表）。
3.細胞内抗原を認識可能なキメラ抗原受容体の作成：細胞内抗原を認識可能なメラ抗原受容体の作成を目指した。ファージディスプレイライブラリー法を用いて組換えHLA-A2402分子と細胞内がん抗原WT1由来ペウチドとの複合体に結合するscFv抗体をスクリーニングし、目的の複合体を特異的に認識する抗体WT#213を取得した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
1: Research has progressed more than it was originally planned.
Reason
「輸注細胞のMHC発現抑制技術の開発」と「受容体改変T細胞を用いた、非自己排除評価系の確立と非自己排除因子の解明」について予定通りに研究が進み、さらに新たながん認識抗原受容体遺伝子として細胞内抗原を認識可能なキメラ抗原受容体の作成にも成功している。
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| Strategy for Future Research Activity |
1. 輸注細胞のMHC発現抑制技術の開発：平成27年度の研究を発展させ、β2ミクログロブリン発現抑制CRISPR-Cas9をヒトT細胞株に遺伝子導入し、MHC class Iの発現低下を確認し、効率が良かったCRISPR-Cas9を用いてレトロウイルスベクターを作成する。作成したCRISPR-Cas9レトロウイルスベクターを感染させることでヒト末書血リンパ球に効率良くMHC class I発現欠失を誘導することを確認する。siTCRベクターによる腫瘍特異的TCR遺伝子導入と組み合わせて、内因性TCR抑制、MHC classI欠失、腫瘍特異的TCR陽性の、受容体改変ステルスT細胞が作成可能であることを示す。
2. 受容体改変T細胞を用いた、非自己排除評価系の確立と非自己排除因子の解明：平成27年度の研究を発展させ、内因性TCR発現を抑制して非自己反応性を減弱させたT細胞が反応する際のマルチファンクション性について解析する。上記1で作成する受容体改変ステルスT細胞についても反応する際のマルチファンクション性について解析する。
3. 細胞内抗原を認識可能なキメラ抗原受容体の作成：平成27年度の研究を発展させ、HLA-A2402分子と細胞内がん抗原WT1由来ペウチドとの複合体を特異的に認識する抗体WT#213を用いたキメラ抗原受容体遺伝子導入T細胞(CAR)を作成し、インビボにおける効果を重度免疫不全NOGマウスにて評価する。さらに本CARを用いた受容体改変ステルスT細胞の作成を行う。
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Research Products
(17 results)
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[Journal Article] Clinical relevance of antigen spreading pattern induced by CHP-MAGE-A4 cancer vaccination.2016
Author(s)
Miyauchi K, Tsuchikawa T, Wada M, Abiko T, Kyogoku N, Shichinohe T, Miyahara Y, Kageyama S, Ikeda H, Shiku H, Hirano S.
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Journal Title
Immunotherapy
Volume: Epub ahead of print
Pages: Epub ahead
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Adoptive transfer of MAGE-A4 T-cell receptor gene－transduced lymphocytes in patients with recurrent esophageal cancer.2015
Author(s)
Kageyama S, Ikeda H, Miyahara Y, Imai N, Ishihara M, Saito K, Sugino S, Ueda S, Ishikawa T, Kokura S, Naota H, Ohishi K, Shiraishi T, Inoue N, Tanabe M, Kidokoro T, Yoshioka H, Tomura D, Nukaya I, Mineno J, Takesako K, Katayama N, Shiku H.
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Journal Title
Clinical Cancer Research
Volume: 21
Pages: 2268-2277
DOI
Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] 2015 Guidance on cancer immunotherapy development in early‐phase clinical studies.2015
Author(s)
Teruyo Arato, Takashi Daimon, Yuji Heike, Ken Ishii, Kyogo Itho, Shinichi Kageyama, Yutaka Kawakami, Eiichi Nakayama, Keiya Ozawa, Noriyuki Sato, Hiroshi Shiku, Masahiro Takeuchi, Kenzaburo Tani, Koji Tamada, Ryuzo Ueda, Hiroaki Ikeda, et al.
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Journal Title
Cancer Science
Volume: 106
Pages: 1761-1771
DOI
Peer Reviewed / Int'l Joint Research
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[Presentation] Immunotherapy with chimeric antigen receptor targeting intracellular WT1 gene product complexed with HLA-A*24:02 molecule2015
Author(s)
Hiroaki Ikeda, Yasushi Akahori, Motohiro Yoneyama, Yuki Orito, Yoshihiro Miyahara, Yasunori Amaishi, Sachiko Okamoto, Junichi Mineno, Kazutoh Takesako, Hiroshi Fujiwara, Masaki Yasukawa, Hiroshi Shiku
Organizer
57th ASH Annual Meeting and Exposition
Place of Presentation
Orlando, USA
Year and Date
2015-12-05 – 2015-12-08
Int'l Joint Research
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[Presentation] Development of immunotherapy with chimeric antigen receptor targeting intracellular WT1 gene product presented on HLA-A*24:02 molecule2015
Author(s)
Yasushi Akahori, Motohiro Yoneyama, Hiroaki Ikeda, Yuki Orito, Yoshihiro Miyahara, Yasunori Amaishi, Sachiko Okamoto, Junichi Mineno, Kazutoh Takesako, Hiroshi Fujiwara, Masaki Yasukawa, Hiroshi Shiku
Organizer
がん免疫療法・マクロファージ国際会議 2015
Place of Presentation
東京大学（東京都・文京区）
Year and Date
2015-07-09 – 2015-07-11
Int'l Joint Research
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[Presentation] Donor lymphocyte infusion thrapy utilizing genetically engineered lymphocytes that express tumor-specific TCR and siRNA for endogenous TCR enables tumor eradication without GvHD induction.2015
Author(s)
Ikeda H, Ueno H, Tawara I, Kawamura A, Okamori K, Imai N, Okamoto S, Mineno J, Takesako K, Katayama N, Shiku H.
Organizer
13th Annual Meeting of Association of Cancer Immunotherapy (CIMT).
Place of Presentation
Mainz, Germany
Year and Date
2015-05-12 – 2015-05-12
Int'l Joint Research
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