2017 Fiscal Year Annual Research Report
Analysis of migration factor expressed in dendritic cells during metal allergy development
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15K11161
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| Research Institution | The University of Tokushima |
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Principal Investigator |
渡邉 恵 徳島大学, 病院, 講師 (40380050)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
後藤 崇晴 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(歯学系), 助教 (00581381)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | 金属アレルギー / ケラチノサイト / 樹状細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
マウスケラチノサイト株Pam2.12およびヒトケラチノサイト株HaCaTをニッケル（Nickel;Ni）で刺激して24時間後のTSLP発現を観察すると，どちらの細胞株もTSLPの発現増強を認めた．そこでPam2.12にTSLP siRNAを導入してTSLPの発現を減弱した後，Niで刺激すると，MAPキナーゼの中でも特にp38の発現の減弱を認めた．
樹状細胞（dendritic cells; DC）をNiで刺激するとTSLPRの発現が増強し，p38およびGプロテインRhoA，Rac1の発現増強を認めた．そこでケモタキシスアッセイにより，TSLPを加えて培養したDCのNi刺激に対する遊走能の変化を観察したところ，アッセイ開始から6時間から12時間の間に，Ni刺激群において遊走したDC数の増加を認めた．いくつかの金属を染色する蛍光色素NewportgreenはNiも染色することで知られているが，TSLPを加えてからNiで刺激したDCをNewportgreenで染色した後，マウス皮下に投与して，24時間後の頸部リンパ節に含まれる細胞をフローサイトメーターで解析したところ，CD11c/FITC (Newportgreen)ダブルポジティブの細胞群の軽度上昇を認めた．
次にDCにTSLPR siRNAの導入を試みたが，導入効率が悪かったため，TSLPR siRNAをマウス皮下に注入するin vivo実験で検討することにした．
TSLP siRNAをすでにNiで感作しているマウス耳介皮下に投与し，3日後，アジュバントと共にNiを耳介皮下に投与してアレルギーを誘導したところ，耳介皮膚の腫脹は有意に減弱した．同様に，TSLPR siRNAを耳介皮下に投与した後にアレルギーを誘導したところ，皮膚の腫脹はわずかに減弱する傾向がみられた．
in vitro，in vivoの結果を合わせると，ケラチノサイト上のTSLP とDC上のTSLPRの相互作用がNiアレルギーの惹起において重要な役割を果たしている可能性が示唆された．
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