2021 Fiscal Year Annual Research Report
哺乳類減数分裂における相同染色体間の結合を確立する仕組み
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18H02353
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| Research Institution | Kobe University |
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Principal Investigator |
李 智博 神戸大学, 農学研究科, 准教授 (50372660)
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2018-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | 減数分裂 / コヒーシン / 精母細胞 / 相同染色体 / 対合 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
近年，姉妹染色分体の接着を担うコヒーシンの研究により，減数分裂の染色体分離を制御する分子メカニズムの概要はわかってきたが，減数分裂において相同染色体がどのようにお互いを認識し，結合を確立するか，そのメカニズムは解明されていない。本申請課題では，申請者が発見したRAD21LとREC8の2種類の減数分裂特異的コヒーシンサブユニットに着目して，相同染色体間の結合の分子基盤を明らかにすることを目的としている。
本年度は，前年度までに作製した２種類の遺伝子改変マウス（Rec8-3×Flag KIマウス，Rad21L-3×Flag KIマウス）の精巣抽出液を材料に，抗3×FLAG抗体と標準3×FLAGレコンビナントタンパク質を用いたウェスタンブロット法により，RAD21LとREC8 の減数分裂細胞における相対量と絶対量を測定し，第一減数分裂前期の初期には，RAD21LとREC8はほぼ等量存在し，両者の総量は既報の体細胞内におけるコヒーシン量より多くなるものの，桁違いの差はないことがわかった。この発現量の結果をまとめて，現在，論文を作成中である。また，上記の精巣抽出液と野生型マウスの精巣抽出液を材料に，抗FLAG抗体を使用した共免疫沈降物の質量分析解析により，野生型マウスでは検出されず，ノックインマウスでだけ検出される，RAD21L，REC8と新規に相互作用するタンパク質の有望な候補を同定してきている。これについては，今後in vitroでの相互作用実験を行い，論文としてまとめる予定である。また，質量分析の結果から，RAD21LとREC8でコヒーシンサブユニットの構成比が異なることも見出しており，今後追加の実験を行い，論文として投稿予定である。
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| Research Progress Status |
令和3年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
令和3年度が最終年度であるため、記入しない。
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