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2008 Fiscal Year Annual Research Report

人工核酸によるRNAの検出と精製

Research Project

Project/Area Number 19021034
Research InstitutionOkayama University

Principal Investigator

大槻 高史  Okayama University, 大学院・自然科学研究科, 准教授 (80321735)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 北松 瑞生  岡山大学, 大学院・自然科学研究科, 助教 (60379716)
Keywords人工核酸 / PNA / miRNA / noncoding RNA / アレイ / RNA精製 / ペプチド核酸
Research Abstract

人工核酸の一種であるペプチド核酸(PNA)は、ペプチド骨格に核酸塩基が付いた構造をもつ。PNAの特徴の一つは、相補的なRNAと非常に強く結合することであり、同じ配列のDNAやRNAと比べても格段にRNA結合能が高く、また配列特異性も優れている。本研究では、この特性を生かして、以下の2つの研究を行った。
1) 近年miRNAと呼ばれる小さなRNAが多数存在し、広範な生命機能を制御していることが明らかになり、様々な状態における生体内のmiRNA発現量を調べることが生命科学研究における重要課題となってきた。本研究課題では、PNAがRNAに特異的に強く結合する特性を生かし、miRNAを高感度に検出するためのPNAアレイの開発を行った。様々な状態の細胞、特に様々な疾患におけるmiRNAの発現量を網羅的に調べることは、現在急務になっている。そのため疾患に関係するmiRNAなどを題材としてPNAアレイの能力を検証した。10merのPNAプローブを用いたところ, miRNAの検出によく用いられるDNAプローブ(10merおよび20mer)と比べ, 非常に感度の良い検出が可能になった。
2) RNA混合物の中から単一のRNA種を精製する方法として、PNAを固相担体とする簡便なRNA精製法の開発に取り組んだ。固定化PNA法が、低温で高効率にRNAを単離でき、多くのRNAに拡張できる方法であることを示した。

  • Research Products

    (25 results)

All 2009 2008

All Journal Article (7 results) (of which Peer Reviewed: 5 results) Presentation (16 results) Book (1 results) Patent(Industrial Property Rights) (1 results)

  • [Journal Article] PNA arrays for miRNA detection2009

    • Author(s)
      Endoh, T., Kitamatsu, M., Sisido M. and Ohtsuki, T.
    • Journal Title

      Chemistry Letters 38

      Pages: 438-439

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] 細胞内侵入性RNA結合蛋白質によるRNAデリバリー2009

    • Author(s)
      大槻高史
    • Journal Title

      高分子 58(3)

      Pages: 140-141

  • [Journal Article] キャリアペプチドによるRNAの細胞内導入法2009

    • Author(s)
      大槻高史, 遠藤玉樹
    • Journal Title

      生化学 81(2)

      Pages: 110-112

  • [Journal Article] Isolation of small RNAs using biotinylated PNAs2008

    • Author(s)
      Ohtsuki, T., Fujimoto, T., Kamimukai, M., Kumano, C., Kitamatsu, M., Sisido, M.
    • Journal Title

      Journal of Biochemistry 144

      Pages: 415-418

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Modified uridines with C5-methylene substituents at the first position of the tRNA anticodon stabilize U. G wobble pairing during decoding2008

    • Author(s)
      Kurata, S., Weixlbaumer, A., Ohtsuki, T., Wada, T., Kirino, Y., Takai, K., Watanabe, K. Ramakrishnan, V. and Suzuki, T.
    • Journal Title

      J. Biol. Chem. 283

      Pages: 18801-18811

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Amino acid sensing using aminoacyl-tRNA synthetase2008

    • Author(s)
      Kugimiya, A., Morii, M. and Ohtsuki, T.
    • Journal Title

      Analytical Biochemistry 378

      Pages: 90-92

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Cellular siRNA delivery mediated by a cell-permeant RNA-binding protein and photoinduced RNA interference2008

    • Author(s)
      Endoh, T., Sisido M. and Ohtsuki, T.
    • Journal Title

      Bioconjugate Chemistry 19

      Pages: 1017-1024

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 酵素法を用いるアミノ酸の計測2009

    • Author(s)
      小原香・大槻高史・釘宮章光
    • Organizer
      日本化学会第89春季年会
    • Place of Presentation
      東京
    • Year and Date
      2009-03-27
  • [Presentation] RNAi創薬を目指した新規RNAキャリアの開発2009

    • Author(s)
      大槻高史
    • Organizer
      第2回高度医療都市を創出する未来技術国際シンポジウム
    • Place of Presentation
      岡山
    • Year and Date
      2009-02-05
  • [Presentation] アルギニン誘導体の蛋白質への位置特異的導入2008

    • Author(s)
      鈴江良隆, 大槻高史, 宍戸昌彦
    • Organizer
      第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会合同大会
    • Place of Presentation
      神戸
    • Year and Date
      2008-12-11
  • [Presentation] 哺乳細胞を用いた非天然アミノ酸導入蛋白質合成法の開発2008

    • Author(s)
      土井芳朗, 大槻高史, 宍戸昌彦
    • Organizer
      第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会合同大会
    • Place of Presentation
      神戸
    • Year and Date
      2008-12-11
  • [Presentation] EF-Tu変異体によるアミノアシルtRNAの精製・定量法2008

    • Author(s)
      山本浩道, 土井芳朗, 大槻高史, 宍戸昌彦
    • Organizer
      第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会合同大会
    • Place of Presentation
      神戸
    • Year and Date
      2008-12-11
  • [Presentation] RNA-蛋白質ハイブリッド型FRETプローブを用いた低分子化合物の検出2008

    • Author(s)
      新谷諒、遠藤玉樹、三重正和、小畠英理、大槻高史、宍戸昌彦
    • Organizer
      第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会合同大会
    • Place of Presentation
      神戸
    • Year and Date
      2008-12-11
  • [Presentation] tRNA構造との対応関係を越えたショウジョウバエミトコンドリアEF-TuのtRNA認識能2008

    • Author(s)
      佐藤文、末松卓真、大槻高史、渡邊洋一
    • Organizer
      第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会合同大会
    • Place of Presentation
      神戸
    • Year and Date
      2008-12-11
  • [Presentation] Position specific incorporation of nonnatural amino acids into proteins in vivo2008

    • Author(s)
      Satoshi Neki, Takashi Ohtsuki, and Masahiko Sisido
    • Organizer
      21st Annual and International Meeting of Japanese Association for Animal Cell Technology
    • Place of Presentation
      Fukuoka
    • Year and Date
      2008-11-25
  • [Presentation] Improvement of CPP-RBD for siRNA delivery2008

    • Author(s)
      Rina Kuwabara, Tamaki Endoh, Masahiko Sisido, and Takashi Ohtsuki
    • Organizer
      21st Annual and International Meeting of Japanese Association for Animal Cell Technology
    • Place of Presentation
      Fukuoka
    • Year and Date
      2008-11-25
  • [Presentation] 細胞内での非天然アミノ酸導入蛋白質合成法の開発2008

    • Author(s)
      土井芳朗, 大槻高史, 宍戸昌彦
    • Organizer
      第3回バイオ関連化学合同シンポジウム
    • Place of Presentation
      東京
    • Year and Date
      2008-09-19
  • [Presentation] EF-Tu変異体を用いた非天然アミノアシルtRNAの精製と定量2008

    • Author(s)
      山本浩道, 土井芳朗, 大槻高史, 宍戸昌彦
    • Organizer
      第3回バイオ関連化学合同シンポジウム
    • Place of Presentation
      東京
    • Year and Date
      2008-09-19
  • [Presentation] CLIP-RNAi~photoinduced RNAi strategy~2008

    • Author(s)
      Tamaki Endoh, Masahiko Sisido, Takashi Ohtsuki
    • Organizer
      3rd International Workshop on Approaches to Single-Cell Analysis
    • Place of Presentation
      Zurich (Switzerland)
    • Year and Date
      2008-09-11
  • [Presentation] Construction of RNA-protein Hybrid for Bioimaging of Low-molecular Compounds2008

    • Author(s)
      Tamaki Endoh, Ryo Shintani, Masayasu Mie, Eiry Kobatake, Takashi Ohtsuki, Masahiko Sisido
    • Organizer
      3rd International Workshop on Approaches to Single-Cell Analysis
    • Place of Presentation
      Zurich (Switzerland)
    • Year and Date
      2008-09-11
  • [Presentation] 細胞内生理活性分子検出のためのRNA-タンパク質ハイブリッド型FRETプローブの構築2008

    • Author(s)
      遠藤玉樹、新谷諒、三重正和、小畠英理、大槻高史、宍戸昌彦
    • Organizer
      第10回RNAミーティング
    • Place of Presentation
      札幌
    • Year and Date
      2008-07-24
  • [Presentation] 蛍光標識CPP-RBPによるRNAiの光誘導2008

    • Author(s)
      遠藤玉樹、宍戸昌彦、大槻高史
    • Organizer
      第10回RNAミーティング
    • Place of Presentation
      札幌
    • Year and Date
      2008-07-24
  • [Presentation] 蛍光標識CPP-RBPによるRNAデリバリーとRNAiの光制御2008

    • Author(s)
      遠藤玉樹、宍戸昌彦、大槻高史
    • Organizer
      遺伝子・デリバリー研究会第8回シンポジウム
    • Place of Presentation
      大阪
    • Year and Date
      2008-05-09
  • [Book] The central dogma : from DNA to MA, and to protein. In Automation in Proteomics and Genomics, eds by G. Alterovitz, R. Benson and M. Ramoni2009

    • Author(s)
      Ohtsuki, T. and Sisido M.
    • Total Pages
      18(担当部分)
    • Publisher
      Wiley
  • [Patent(Industrial Property Rights)] 乳酸菌により二本鎖RNAを生成するキット及びその利用2008

    • Inventor(s)
      大槻高史、宍戸昌彦、公文裕巳、柏倉祐司、落合和彦
    • Industrial Property Rights Holder
      岡山大学
    • Industrial Property Number
      特許, 特愿2008-279228
    • Filing Date
      2008-10-30

URL: 

Published: 2010-06-11   Modified: 2016-04-21  

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