2015 Fiscal Year Annual Research Report
エンドソーム膜タンパク質品質管理におけるE3リガーゼの役割
Publicly Offered Research
| Project Area | New aspect of the ubiquitin system : its enormous roles in protein regulation |
|---|
| Project/Area Number |
15H01192
|
|---|
| Research Institution | Kwansei Gakuin University |
|---|
Principal Investigator |
沖米田 司 関西学院大学, 理工学部, 准教授 (90398248)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2017-03-31
|
| Keywords | ユビキチンリガーゼ / エンドソーム / エンドサイトーシス |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
1. エンドソーム局在E3リガーゼ変異体過剰発現実験の結果，RING domain, エンドソーム局在に関わるN末端領域，および中央部のunstructured 領域がΔF508-CFTR膜発現抑制効果に必要であることが明らかとなった．さらに，pull-down assay および BiFC 法の結果，ΔF508-CFTRとの相互作用にエンドソーム局在E3リガーゼのN末端領域が必要であることが明らかとなった．さらに，ノックダウン実験の結果，post-Golgi区画におけるエンドソーム局在E3リガーゼとΔF508-CFTRの相互作用は，Hsc70 分子シャペロン非依存的であることが明らかとなった．
2. ノックダウン実験の結果，エンドソーム局在E3リガーゼは，ΔF508-CFTRのエンドサイトーシスを阻害し，初期エンドソームからリソソームへの輸送を阻害した．しかしながら，エンドソーム局在E3リガーゼノックダウンは，トランスフェリン受容体やユビキチン結合アダプター依存的にエンドサイトーシスされる CD4TccUb(AllRΔG) のエンドサイトーシスは阻害しなかった．従って，エンドソーム局在E3リガーゼはエンドサイトーシスの分子機構自体には影響を与えないが，形質膜における異常タンパク質のユビキチン化を制御し，エンドサイトーシスを間接的に制御すると共に，初期エンドソームからリソソーム経路へのソーティングも制御する可能性が考えられた．
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
1: Research has progressed more than it was originally planned.
Reason
次年度に行う予定である結合タンパク質探索や，精製タンパク質を用いた in vitro ユビキチン化の再構成実験の準備が整ったため．
|
| Strategy for Future Research Activity |
計画通りに進展しており，今後も計画に従い研究を推進する．さらに，エンドソーム局在E3リガーゼの翻訳後修飾による活性制御の可能性が示唆されたため，その可能性についても今後追求していく．
|
Research Products
(3 results)
