ネオアンチゲン反応性リンパ球を用いた治療抵抗性乳癌治療法の開発

• Project/Area Number: 21K19532
• Research Category: Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Review Section: Medium-sized Section 55:Surgery of the organs maintaining homeostasis and related fields
• Research Institution: Kyushu University
• Principal Investigator: 久保 真 九州大学, 医学研究院, 准教授 (60403961)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 甲斐 昌也 九州大学, 医学研究院, 共同研究員 (10755242) ; 森 瞳美 九州大学, 医学研究院, 共同研究員 (70795541) ; 森崎 隆 九州大学, 医学研究院, 共同研究員 (90291517) ; 井手野 昇 九州大学, 医学研究院, 助教 (90883421)
• Project Period (FY): 2021-07-09 – 2024-03-31
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2023)
• Budget Amount: ¥6,500,000 (Direct Cost: ¥5,000,000、Indirect Cost: ¥1,500,000); Fiscal Year 2023: ¥2,340,000 (Direct Cost: ¥1,800,000、Indirect Cost: ¥540,000); Fiscal Year 2022: ¥2,080,000 (Direct Cost: ¥1,600,000、Indirect Cost: ¥480,000); Fiscal Year 2021: ¥2,080,000 (Direct Cost: ¥1,600,000、Indirect Cost: ¥480,000)
• Keywords: ネオアンチゲン / 体細胞性遺伝子変異 / ペプチド / TIL / MHCテトラマー解析 / 腫瘍浸潤リンパ球（TIL）

Outline of Research at the Start

本研究は、腫瘍に限らず転移リンパ節からTILを抽出し、TILの機能を強化するという点で探索的、挑戦的である。医療経済にやさしく、日本独自の「細胞医薬」を開発したいと強く思った。自己リンパ球であるTILを用いた細胞療法は副作用が少なく、免疫抑制剤も必要ない。今後は安全な「細胞医薬」としてのTILをいかに効果的に働かせるか、モジュレーター研究が重要になる。本研究は、臨床への実用化に最も近い位置にあり、実装への挑戦的研究と位置付けることができると考える。

Outline of Annual Research Achievements

がん細胞に特異的に生じる体細胞性遺伝子変異に由来するペプチドであるネオアンチゲン（以下、ネオ抗原）は、がん細胞特異的で、高い免疫原性を持っていることをより深く解明し、臨床応用へと繋げる。
【１．腫瘍微小環境、さらに腸内細菌叢との関連の解析】乳癌腫瘍周辺部の腫瘍浸潤リンパ球（TIL）は、腫瘍内細菌と腸内細菌叢の影響を受けることを健常人のパブリックデータを利用して明らかにした（学会発表・山田）。
【２．転移・再発乳癌の末梢血に潜むTILの機能解析】
（１）腫瘍、転移リンパ節、末梢血に潜むTILの機能解析；In Silico解析にて、HLA ClassI/II拘束性ネオ抗原のうちHLA親和性の高いネオ抗原ペプチドを予測した（データ収集、論文作成中）。
（２）「細胞医薬」としての腫瘍浸潤リンパ球（TIL）強化療法；腫瘍細胞内もしくは周囲（末梢血を含む）TILを採取し、ネオ抗原ペプチドを認識する樹状細胞と共培養して、強化したT細胞をテトラマー解析した（データ収集、論文作成中）。
【３． TIL強化療法におけるネオ抗原ペプチド樹状細胞ワクチンの機能解析】上記で予測されたネオ抗原ペプチドを自己PBMCから樹立した樹状細胞にパルスし、TILと共培養する。TILの強化の意義をElispot試験、細胞障害試験、マウス移植・治療実験を用いて解析する。HLA ClassI/IIに親和性のあるネオ抗原ペプチドを予測し、樹状細胞にパルス、CTL誘導に成功した（論文・Morisaki S）。

Research Products

• [Journal Article] TP53 and/or BRCA1 Mutations Based on CtDNA Analysis as Prognostic Biomarkers for Primary Triple-Negative Breast Cancer (2024)
  • Author(s): Arimura Akiko、Sakai Kazuko、Kaneshiro Kazuhisa、Morisaki Takafumi、Hayashi Saori、Mizoguchi Kimihisa、Yamada Mai、Kai Masaya、Ono Mayumi、Nishio Kazuto、Nakamura Masafumi、Kubo Makoto
  • Journal Title: Cancers Volume: 16 Issue: 6 Pages: 1184-1184
  • DOI: 10.3390/cancers16061184
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Immunological analysis of hybrid peptide encompassing class I/II neoepitope-pulsed dendritic cell vaccine. (2023)
  • Author(s): Morisaki S, Onishi H, Morisaki T, Kubo M, Umebayashi M, Tanaka H, Koya N, Nakagawa S, Tsujimura K, Yoshimura S, Yew PY, Kiyotani K, Nakamura Y, Nakamura M, Kitazono T, Morisaki T.
  • Journal Title: Front. Immunol Volume: 14 Pages: 1223331-1223331
  • DOI: 10.3389/fimmu.2023.1223331
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Granzyme B Expression in the Tumor Microenvironment as a Prognostic Biomarker for Patients with Triple-Negative Breast Cancer (2023)
  • Author(s): Mizoguchi Kimihisa、Kawaji Hitomi、Kai Masaya、Morisaki Takafumi、Hayashi Saori、Takao Yuka、Yamada Mai、Shimazaki Akiko、Osako Tomofumi、Arima Nobuyuki、Okido Masayuki、Oda Yoshinao、Nakamura Masafumi、Kubo Makoto
  • Journal Title: Cancers Volume: 15 Issue: 18 Pages: 4456-4456
  • DOI: 10.3390/cancers15184456
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Lymph nodes as anti-tumor immunotherapeutic tool: intranodal tumor-specific antigen-pulsed dendritic cell vaccine immunotherapy (2022)
  • Author(s): Morisaki T, Morisaki T, Kubo M, Morisaki S, Nakamura Y, Onishi H
  • Journal Title: Cancers Volume: 14(10) Issue: 10 Pages: 2438-2438
  • DOI: 10.3390/cancers14102438
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] CCND1 Copy Number Variation in Circulating Tumor DNA from Luminal B Breast Cancer Patients (2022)
  • Author(s): SHIMAZAKI AKIKO、KUBO MAKOTO、KURATA KANAKO、TAKAO YUKA、HAYASHI SAORI、HARADA YURINA、KAWAJI HITOMI、KANESHIRO KAZUHISA、YAMADA MAI、KAI MASAYA、NAKAMURA MASAFUMI
  • Journal Title: Anticancer Research Volume: 42 Issue: 8 Pages: 4071-4077
  • DOI: 10.21873/anticanres.15904
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Significance of the Multi-gene Panel myRisk in Japan (2022)
  • Author(s): HAYASHI SAORI、KUBO MAKOTO、MATSUZAKI SAWAKO、KAI MASAYA、MORISAKI TAKAFUMI、YAMADA MAI、KANESHIRO KAZUHISA、TAKAO YUKA、SHIMAZAKI AKIKO、NAGAYOSHI KINUKO、MIZUUCHI YUSUKE、NAKAMURA MASAFUMI
  • Journal Title: Anticancer Research Volume: 42 Issue: 8 Pages: 4097-4102
  • DOI: 10.21873/anticanres.15907
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Genetic medicine is accelerating in Japan (2022)
  • Author(s): Hayashi Saori、Kubo Makoto、Kaneshiro Kazuhisa、Kai Masaya、Yamada Mai、Morisaki Takafumi、Takao Yuka、Shimazaki Akiko、Shikada Sawako、Nakamura Masafumi
  • Journal Title: Breast Cancer Volume: 印刷中 Issue: 4 Pages: 659-665
  • DOI: 10.1007/s12282-022-01342-4
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Presentation] 乳癌患者とネオアンチゲン解析との関連性の検討 (2023)
  • Author(s): 溝口公久, 森崎隆史, 甲斐昌也, 高尾由佳, 山田舞, 島﨑亜希子, 林 早織, 茂地智子, 伊地知秀樹, 森崎隆, 吉住朋晴, 久保真, 中村雅史
  • Organizer: 第31回日本乳癌学会学術総会
• [Presentation] 腫瘍遺伝子変異量(TMB):乳癌におけるバイオマーカーとしての意義 (2023)
  • Author(s): 久保真, 森崎隆史, 溝口公久, 中垣環, 馬場英司, 中村雅史
  • Organizer: 第31回日本乳癌学会学術総会
• [Presentation] 日本人乳癌患者の腸内細菌叢解析についての検討 (2023)
  • Author(s): 山田舞, 久保真, 甲斐昌也, 森崎隆史, 溝口公久, 高尾由佳, 林早織, 島崎亜希子, 古賀艶可, 落合百合菜, 茂地智子, 伊地知秀樹, 吉住朋晴, 中村雅史
  • Organizer: 第31回日本乳癌学会学術総会
• [Presentation] 溝口公久, 久保真, 高尾由佳, 島﨑亜希子, 林早織, 山田舞, 森崎隆史, 甲斐昌也, 中村雅史 (2023)
  • Author(s): トリプルネガティブ乳癌の腫瘍微小環境におけるGranzyme Bのバイオマーカーとしての役割
  • Organizer: 第123回日本外科学会定期学術集会
• [Presentation] TN乳癌の治療戦略・DNA損傷と腫瘍免疫 (2022)
  • Author(s): 久保 真
  • Organizer: 第30回日本乳癌学会学術総会
  • Invited
• [Presentation] HBOC診療の現状と課題 (2022)
  • Author(s): 久保 真, 鹿田 佐和子, 甲斐 昌也, 森崎 隆史, 木村 緑, 小川 昌宣, 加藤 聖子, 水内 祐介, 中村 雅史
  • Organizer: 第28回日本遺伝性腫瘍学会学術集会
  • Invited
• [Presentation] シングルセルRNA sequencingシークエンシングを用いたHER2陽性乳癌治療抵抗性の網羅的遺伝子解析 (2022)
  • Author(s): 林 早織, 久保 真, 森 瞳美, 甲斐 昌也, 山田 舞, 金城 和寿, 森崎 隆史, 高尾 由佳, 島﨑 亜希子, 中村 雅史
  • Organizer: 第122回日本外科学会定期学術集会