| 研究課題/領域番号 |
06671585
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
泌尿器科学
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| 研究機関 | 京都大学 |
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研究代表者 |
寺井 章人 京都大学, 医学研究科, 助手 (50243019)
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| 研究分担者 |
小川 修 京都大学, 医学研究科, 助手 (90260611)
寛 善行 (筧 善行) 京都大学, 医学研究科, 講師 (20214273)
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| 研究期間 (年度) |
1994 – 1996
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| 研究課題ステータス |
完了 (1996年度)
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| 配分額 *注記 |
2,200千円 (直接経費: 2,200千円)
1996年度: 700千円 (直接経費: 700千円)
1995年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
1994年度: 700千円 (直接経費: 700千円)
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| キーワード | ヒト前立腺癌細胞株 / PC93 / 増殖促進作用 / 線維芽細胞 / 成長因子 / 蛋白精製 / 前立腺癌細胞株 / 増殖因子 / 中和抗体 / ヌードマウス皮下移植 |
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| 研究概要 |
ホルモン非依存性のヒト前立腺癌細胞株PC93はヌードマウス可移植性であるが、前立腺由来の線維芽細胞や骨髄由来の線維芽細胞株を同時移植することによってin vivo増殖が促進される。正常前立腺線維芽細胞の培養上清にPC93増殖促進作用が見られた。既知の成長因子ではaFGF、bFGF、EGF、TGFαが増殖促進作用を有した。RT-PCR法により線維芽細胞中の成長因子mRNAの発現を検索したところ、bFGF mRNAのみが確認できた。成長因子の中和抗体を用いた阻害作用の検討では、bFGF抗体、EGF抗体、およびbFGF抗体+EGF抗体によっても100%阻害は見られなかった。この結果、未知の成長因子の存在が示唆されたため、in vitro足場非依存性PC93増殖促進活性を指標にこの因子の精製を押し進めようとした。ヘパリンカラムクロマトグラフィーにおいてヘパリン未吸着分画、0.5Mおよび1.0M NaCl溶出画分に増殖促進活性が見られた。比活性が強いと思われた0.5M NaCl溶出画分についてさらにゲルクロマトグラフィーを行ったところ、既知の前立腺癌増殖因子とは分子量の異なる約32KDaの蛋白質を見出した。ヘパリンカラムクロマトグラフィーにおける上記3画分のうち実際にはどれがin vivoでの増殖促進に重要であるかは今後の検討課題として残されている。
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