| 研究課題/領域番号 |
14580657
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
機能生物化学
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| 研究機関 | 福井大学(医学部) |
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研究代表者 |
古川 高子 福井大学, 高エネルギー医学研究センター, 助教授 (00221557)
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| 研究期間 (年度) |
2002 – 2003
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| 研究課題ステータス |
完了 (2003年度)
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| 配分額 *注記 |
1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
2003年度: 700千円 (直接経費: 700千円)
2002年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
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| キーワード | クロマチンリモデリング / SWI / SNF / Osa / chromatin remodeling complex / 転写調節 |
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| 研究概要 |
本研究では、ヒトSWI/SNF複合体の最も高分子量の構成成分であるOsaの機能を明らかにするため、まず、drosophilaのOsaとの相同性から、hOsa-1およびhOsa-2のクローニングを行った。両者は共通してARID(AT rich interaction domain)とC末よりに2つのdrosophilaと高い相同性をもつ領域を有していた。Co-immunoprecipitationにより、このC末領域が、hBRGやBRMとの結合に重要であることがわかった。hOsaを培養細胞に発現させると、ステロイドホルモンレセプターを介する転写活性を上昇させた。この作用はARID欠失型のhOsaでは観察されず、ARIDの重要性が示された。また、野生型およびARD欠失型のhOsa-2を、Flag-tagをつけた形で、tetracyclineの濃度コントロールのもとに発現するcell line、TetOff16eとTetOffD6を作成し、hOsa-2を構成成分とする複合体の精製を試みた。両者のnuclear extractのglycerol gradient sedimentationでは、hOsa-2、BRG、BAF155、などのヒトSWI/SNFの構成タンパク質は類似の挙動を示し、ARIDの有無にかかわらず、高分子量の複合体を形成していると考えられた。BAF170についてはTetOff16eとTetOffD6で差が見られ、ARIDとBAF170の間に何らかの相互作用が存在する可能性が示唆された。また、高分子量fractionからimmunoprecipitationにより野生型、ARID欠失型のOsa-2を含むタンパク質複合体を精製したところ、両者の構成に差はなく、複合体形成においてはARIDの影響は認められなかった。
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