| 研究課題/領域番号 |
15K08088
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
医療系薬学
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| 研究機関 | 北海道医療大学 (2016-2017)
北海道大学 (2015) |
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研究代表者 |
柴山 良彦 北海道医療大学, 薬学部, 教授 (90593822)
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| 連携研究者 |
井関 健 北海道大学, 大学院薬学研究院 臨床薬剤学講座, 教授 (40203062)
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| 研究期間 (年度) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2017年度)
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| 配分額 *注記 |
4,940千円 (直接経費: 3,800千円、間接経費: 1,140千円)
2017年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
2016年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2015年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
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| キーワード | 大腸がん / 染色体 / コンデンシン / マイクロRNA / 遺伝子編集 |
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| 研究成果の概要 |
SMC4の機能を明らかにするため、遺伝子編集により形質転換した細胞を作成することを計画した。gRNAを挿入したCRISPR/Cas9ベクターあるいはCRISPR/Cas9ノックアウトプラスミドをトランスフェクションしたが、形質転換は認められなかった。そこでレンチウイルスベクターによる遺伝子導入を行い、Puromycinによる細胞選別を行ったところ、耐性細胞を効果的に選別できたが、Cas9の発現が得られなかった。これらの結果からSMC4 gRNAを含むCRISPR/Cas9の導入は困難と判断し、siRNAを導入する実験を行い、SMC4を効果的に抑制できることを確認した。
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