| 研究課題/領域番号 |
18380061
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
応用微生物学
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| 研究機関 | 富山県立大学 |
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研究代表者 |
浅野 泰久 富山県立大学, 工学部, 教授 (00222589)
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| 研究分担者 |
米田 英伸 富山県立大学, 工学部, 講師 (50285160)
山根 隆 名古屋大学, 工学(系), 教授 (80030055)
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| 研究期間 (年度) |
2006 – 2007
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| 研究課題ステータス |
完了 (2007年度)
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| 配分額 *注記 |
12,650千円 (直接経費: 11,300千円、間接経費: 1,350千円)
2007年度: 5,850千円 (直接経費: 4,500千円、間接経費: 1,350千円)
2006年度: 6,800千円 (直接経費: 6,800千円)
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| キーワード | アミノ酸アミド / ラセマーゼ / 光学分割 / アミダーゼ / aloha-amino-ensilon-canrolactam racemase / D-amino acid |
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| 研究概要 |
1.ACLラセマーゼ遺伝子の合成:全長約1.3kbのAchromobacter obae由来のACLラセマーゼ遺伝子を合成し、アセンブリーPCR反応を行った。本遺伝子を導入した組換え大腸菌のACLラセマーゼ活性を確認した。
2.光学分割に用いる各種アミダーゼの開発:D-アミノペプチダーゼ(DAP)、D-アミノ酸アミダーゼ(DAA)など、各種の微生物由来の約8種類の特異なアミノ酸アミド加水分解酵素の遺伝子解析を終了し、酵素の大量発現を可能にした。
3.アミノ酸アミドのダイミックな光学分割:アミノ酸アミドラセマーゼとOchrobactruman thropiC1-38由来のD-アミノペプチダーゼ(DAP)やD-アミノ酸アミダーゼ(DAA)との組み合わせによる光学活性なD-アミノ酸の合成を検討し、各種のアミノ酸アミドよりダイナミックな光学分割反応を行い、定量的にD-あるいは、L-アミノ酸を得た。
4.DAAの構造解析とACLラセマーゼの進化分子工学:名古屋大学・工学部の山根教授と共に、DAAを2.1Aの解像度で構造解析を行った。ACLラセマーゼ酵素活性の呈色評価法を確立した。
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