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摘出灌流心を用いたイオンチャネルの細胞膜発現量変化の定量的イメージング法

研究課題

研究課題/領域番号 26670118
研究種目

挑戦的萌芽研究

配分区分基金
研究分野 薬理学一般
研究機関山形大学

研究代表者

石井 邦明  山形大学, 医学部, 教授 (10184459)

研究分担者 永澤 悦伸  東邦大学, 薬学部, 講師 (40513057)
研究期間 (年度) 2014-04-01 – 2017-03-31
研究課題ステータス 完了 (2016年度)
配分額 *注記
3,770千円 (直接経費: 2,900千円、間接経費: 870千円)
2015年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2014年度: 2,600千円 (直接経費: 2,000千円、間接経費: 600千円)
キーワードKチャネル / イメージング / 心臓 / GFP変異体 / pH / チャネル / pH感受性 / 心筋 / 受容体
研究成果の概要

摘出心において、KCNQ1(心臓の興奮性に対して重要な役割を有するK+チャネル)の細胞膜発現量の変化をリアルタイムで可視化できる系を確立することを目的に研究を行なった。
1.pHluorin(pH感受性が高いGFP変異体)とKCNQ1を融合させたコンストラクトを作製し、α1受容体刺激によってKCNQ1のエンドサイトーシスを起こし検討した。エンドサイトーシスによって酸性環境に置かれるため、pHluorinの蛍光が減弱することが期待されたが、顕著な変化は認められなかった。
2.よりpH感受性の高い変異体を得る目的で、大腸菌の系を用いてスクリーニングを開始したが、目的の変異体はまだ得られていない。

報告書

(4件)
  • 2016 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2015 実施状況報告書
  • 2014 実施状況報告書
  • 研究成果

    (22件)

すべて 2017 2016 2015 2014 2013

すべて 雑誌論文 (6件) (うち国際共著 1件、 査読あり 6件、 オープンアクセス 3件、 謝辞記載あり 2件) 学会発表 (16件)

  • [雑誌論文] Licochalcones extracted from Glycyrrhiza inflata inhibit platelet aggregation accompanied by inhibition of COX-1 activity2017

    • 著者名/発表者名
      Okuda-Tanino A, Sugawara D, Tashiro T, Iwashita M, Obara Y, Moriya T, Tsushima C, Saigusa D, Tomioka Y, Ishii K, Nakahata N
    • 雑誌名

      PLoS One

      巻: 12 号: 3 ページ: e0173628-e0173628

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0173628

    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] ERK5 induces ankrd1 for catecholamine biosynthesis and homeostasis in adrenal medullary cells2016

    • 著者名/発表者名
      小原 祐太郎、長澤 隆介、根本 亙、Michael J. Pellegrino、高橋 麻穂、Beth A. Habecker、Philip J.S. Stork、一柳 統、伊藤 裕美、冨田 善彦、石井 邦明、中畑 則道
    • 雑誌名

      Cellular Signalling

      巻: 28 号: 3 ページ: 177-189

    • DOI

      10.1016/j.cellsig.2015.12.016

    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
    • 査読あり / 国際共著 / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Phosphorylation of ERK5 on Thr732 is associated with ERK5 nuclear localization and ERK5-dependent transcription.2015

    • 著者名/発表者名
      本多 拓人、小原 祐太郎、山内 新、 Anthony D. Couvillon、 Justin J. Mason、石井 邦明、中畑 則道
    • 雑誌名

      PLoS ONE

      巻: 10 号: 2 ページ: e0117914-e0117914

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0117914

    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Imaging intraorganellar Ca2+ at subcellular resolution using CEPIA.2014

    • 著者名/発表者名
      Suzuki, J., Kanemaru, K., Ishii, K., Ohkura, M., Okubo, Y., and Iino, M.
    • 雑誌名

      Nat. Commun.

      巻: 5 号: 1 ページ: 4153-4153

    • DOI

      10.1038/ncomms5153

    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Is PIP2 involved in the insulin effect?2014

    • 著者名/発表者名
      石井 邦明、Minghua Wu、小原 祐太郎
    • 雑誌名

      Channels

      巻: 8 号: 5 ページ: 391-392

    • DOI

      10.4161/19336950.2014.948758

    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Insulin suppresses IKs (KCNQ1/KCNE1) currents, which require β-subunit KCNE1.2013

    • 著者名/発表者名
      呉 明華、小原 祐太郎、野呂田 郁夫、永澤 悦伸、石井 邦明
    • 雑誌名

      Pflugers Archiv - Eur J Physiol

      巻: - 号: 5 ページ: 937-946

    • DOI

      10.1007/s00424-013-1352-7

    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] Roles of ERK5 in ion channel expression in PC12 cells2017

    • 著者名/発表者名
      Kashino Y, Obara Y, Ishii K
    • 学会等名
      第90回日本薬理学会年会
    • 発表場所
      長崎ブリックホール(長崎県長崎市)
    • 年月日
      2017-03-16
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] ラット肺静脈心筋細胞における過分極活性型Cl-チャネルの分子生物学的研究2016

    • 著者名/発表者名
      岡本洋介,石井邦明
    • 学会等名
      第26回日本循環薬理学会
    • 発表場所
      信州大学(長野県松本市)
    • 年月日
      2016-12-02
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] 肺動脈血管平滑筋細胞に発現する内因性のCav1.2はアゼルニジピンにより量的修飾を受ける2016

    • 著者名/発表者名
      那須史明,倉上和也,小原祐太郎,石井邦明
    • 学会等名
      第67回日本薬理学会北部会
    • 発表場所
      北海道大学(北海道札幌市)
    • 年月日
      2016-09-30
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] ラット肺静脈心筋細胞における過分極活性型Cl-チャネルの薬理学的研究2016

    • 著者名/発表者名
      岡本洋介,石井邦明
    • 学会等名
      第67回日本薬理学会北部会
    • 発表場所
      北海道大学(北海道札幌市)
    • 年月日
      2016-09-30
    • 関連する報告書
      2016 実績報告書
  • [学会発表] Intra-organellar Ca2+ signaling imaged using genetically encoded Ca2+ indicators2016

    • 著者名/発表者名
      Suzuki J, Kanamaru K, Ishii K, Ohkura M, Ohkubo Y, Iino M
    • 学会等名
      第89回日本薬理学会年会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜(神奈川県横浜市)
    • 年月日
      2016-03-11
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
  • [学会発表] Effects of high glucose on Kv1.5 and Kir2.1 channels2016

    • 著者名/発表者名
      Jimbu R, Nagasawa Y, Ishii K
    • 学会等名
      第89回日本薬理学会年会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜(神奈川県横浜市)
    • 年月日
      2016-03-10
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
  • [学会発表] Impact of hyper polarization-activated Cl- current on arrhythmogenecity of rat pulmonary vein cardiomyocytes2016

    • 著者名/発表者名
      Okamoto Y, Ono K, Takano M, Ishii K
    • 学会等名
      第89回日本薬理学会年会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜(神奈川県横浜市)
    • 年月日
      2016-03-09
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
  • [学会発表] Cav1.2はアゼルニジピンにより量的修飾をうける.2015

    • 著者名/発表者名
      那須史明,倉上和也,小原祐太郎,石井邦明
    • 学会等名
      第66回日本薬理学会北部会
    • 発表場所
      富山国際会議場(富山県富山市)
    • 年月日
      2015-09-18
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
  • [学会発表] 神経細胞におけるMidnolinの生理的•病理的な役割について.2015

    • 著者名/発表者名
      今井 亨,小原祐太郎,佐藤秀則,加藤丈夫,石井邦明
    • 学会等名
      第66回日本薬理学会北部会
    • 発表場所
      富山国際会議場(富山県富山市)
    • 年月日
      2015-09-18
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
  • [学会発表] Azelnidipine reduces cell-surface expression of Cav1.2 channel.2015

    • 著者名/発表者名
      Nasu F, Kurakami K, Ishii K
    • 学会等名
      第30回日本不整脈学会学術大会・第32回日本心電学会学術集会
    • 発表場所
      国立京都国際会館(京都府京都市)
    • 年月日
      2015-07-29
    • 関連する報告書
      2015 実施状況報告書
  • [学会発表] アゼルニジピンはCav1.2チャネルの細胞膜発現量を減少させる2015

    • 著者名/発表者名
      那須史明、倉上和也、石井邦明
    • 学会等名
      第88回日本薬理学会年会
    • 発表場所
      名古屋国際会議場(名古屋市熱田区)
    • 年月日
      2015-03-20
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] タンパク質型Ca2+インジケーターCEPIAを用いた小胞体・ミトコンドリア内腔Ca2+動態の可視化と機能解析2015

    • 著者名/発表者名
      鈴木純二、金丸和典、石井邦明、大倉正道、大久保洋平、飯野正光
    • 学会等名
      第88回日本薬理学会年会
    • 発表場所
      名古屋国際会議場(名古屋市熱田区)
    • 年月日
      2015-03-18
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] アゼルニジピンがCav1.2チャネルを量的に修飾する可能性について2014

    • 著者名/発表者名
      那須史明、倉上和也、石井邦明
    • 学会等名
      第24回日本循環薬理学会
    • 発表場所
      山形テルサ(山形市)
    • 年月日
      2014-12-05
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] ERK5とERK1/2のクロストーク機構について2014

    • 著者名/発表者名
      小原祐太郎、本田拓人、山内 新、Couvillon Anthony、Mason Justin、石井邦明、中畑則道
    • 学会等名
      第65回日本薬理学会北部会
    • 発表場所
      コラッセふくしま(福島市)
    • 年月日
      2014-09-27
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] アゼルニジピンがCav1.2チャネルをインターナリゼーションする可能性について2014

    • 著者名/発表者名
      那須史明、倉上和也、石井邦明
    • 学会等名
      第65回日本薬理学会北部会
    • 発表場所
      コラッセふくしま(福島市)
    • 年月日
      2014-09-26
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] Internalization of KCNQ1 by activation of the α1 adrenergic receptor2014

    • 著者名/発表者名
      倉上和也、野呂田郁夫、那須史明、永澤悦伸、小原祐太郎、石井邦明
    • 学会等名
      第31回日本心電学会学術集会
    • 発表場所
      ザ・プリンスパークタワー東京(東京都港区)
    • 年月日
      2014-07-25
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書

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公開日: 2014-04-04   更新日: 2018-03-22  

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