コクシジウム原虫の腸管内発育ステージにおける低酸素適応エネルギー代謝の解明

• 研究課題/領域番号: 25450436
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 獣医学
• 研究機関: 大阪府立大学 (2015-2016); 独立行政法人農業・食品産業技術総合研究機構 (2013-2014)
• 研究代表者: 松林 誠 大阪府立大学, 生命環境科学研究科, 准教授 (00321076)
• 研究期間 (年度): 2013-04-01 – 2017-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2016年度)
• 配分額: 5,200千円 (直接経費: 4,000千円、間接経費: 1,200千円); 2015年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円); 2014年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2013年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
• キーワード: コクシジウム / 呼吸鎖 / 低酸素 / ミトコンドリア / Eimeria tenella / 鶏 / エネルギー代謝 / RNA sequencing / real-time PCR

研究成果の概要

鶏コクシジウム症の制圧は、鶏畜産物の生産現場において、重要な課題である。本研究では、安全な新規薬剤の開発を目指した。病原性の高いEimeria tenella について、ミトコンドリア精製方法の確立および酵素活性測定系を構築することができた。この測定系を用いて、各種化合物の阻害効果を解析したところ、いくつかの化合物で呼吸鎖活性の阻害が確認できた。また、侵入型虫体を精製し、これらの化合物での殺虫効果を解析した結果、μM のオーダーで殺虫効果がみられた。今回確立した解析系は、Eimeria 属原虫の呼吸鎖代謝経路の解明および新規シード化合物の薬剤スクリーニングに有用であると考えられた。

研究成果

• [雑誌論文] Report of fatal mixed infection with Cryptosporidium parvum and Giardia intestinalis in neonatal calves (2017)
  • 著者名/発表者名: Yuu Matsuura, Makoto Matsubayashi, Satoko Nukata, Tomoyuki Shibahara, Osamu Ayukawa, Yasuko Kondo, Tomohide Matsuo, Shigehiko Uni, Masaru Furuya, Hiroyuki Tani, Naotoshi Tsuji, Kazumi Sasai.
  • 雑誌名: Acta Parasitologica 巻: 62(1) 号: 1 ページ: 214-220
  • DOI: 10.1515/ap-2017-0026
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Identification of Eimeria acervulina conoid antigen using chicken monoclonal antibody (2016)
  • 著者名/発表者名: Makoto Matsubayashi, Chisa Minoura, Shintaro Kimura, Hiroyuki Tani, Masaru Furuya, Hyun S. Lillehoj, Haruo Matsuda, Shigeo Takenaka, Takeshi Hatta, Naotoshi Tsuji, Kazumi Sasai.
  • 雑誌名: Parasitology Research 巻: 115(11) ページ: 4123-4128
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Transcriptional profiles of virulent and precocious strains of Eimeria tenella at sporozoite stage; novel biological insight into attenuated asexual development (2016)
  • 著者名/発表者名: Makoto Matsubayashi, Fumiya Kawahara, Takeshi Hatta, Junya Yamagishi, Takeharu Miyoshi, Anisuzzaman, Kazumi Sasai, Takashi Isobe, Kiyoshi Kita, Naotoshi Tsuji
  • 雑誌名: Infection, Genetics and Evolution 巻: 40 ページ: 54-62
  • DOI: 10.1016/j.meegid.2016.02.021
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] First report of molecular identification of Cystoisospora suis in a piglet with lethal diarrhea in Japan (2016)
  • 著者名/発表者名: Makoto Matsubayashi, Hideko Takayama, Masahiro Kusumoto, Misato Murata, Yuka Uchiyama, Masaya Kaji, Kazumi Sasai, Ryosaku Yamaguchi, Tomoyuki Shibahara
  • 雑誌名: Acta Parasitologica 巻: 61(2) 号: 2 ページ: 406-11
  • DOI: 10.1515/ap-2016-0054
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Course of induced infection by Eimeria krijgsmannni in immunocompetent and immunodeficient mice (2016)
  • 著者名/発表者名: Yuina Ono, Makoto Matsubayashi, Hiroaki Kawaguchi, Masashi Tsujio, Masanobu Mizuno, Tetsuya Tanaka, Tatsunori Masatani, Toshihiro Matsui, Tomohide Matsuo
  • 雑誌名: Acta Parasitologica 巻: 115(1) 号: 1 ページ: 211-5
  • DOI: 10.1007/s00436-015-4737-z
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] A serological survey of antobodied against Leptospira spp. from wild raccoons (Procyon lotor) in Osaka, Japan (2016)
  • 著者名/発表者名: Saeki Jun, Nakanishi Hitoshi, Masubuchi Katsuo, Matsubayashi Makoto, Furuya Masaru, Tani Hiroyuki, Sasai Kazumi
  • 雑誌名: Asian Journal of Animal and Veterinary Advances 巻: 未定
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Genetic identification of Entamoeba polecki subtype 3 from pigs in Japan and characterisation of its pathogenic role in ulcerative colitis (2015)
  • 著者名/発表者名: Makoto Matsubayashi, Naoko Murakoshi, Tetsuya Komatsu, Masaharu Tokoro, Makoto Haritani, Tomoyuki Shibahara
  • 雑誌名: Infection, Genetics and Evolution 巻: 36 ページ: 8-14
  • DOI: 10.1016/j.meegid.2015.08.030
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Localization of heat shock protein 110 in canine mammary gland tumor (2015)
  • 著者名/発表者名: Satoru Okada, Masaru Furuya, Shigeo Takenaka, Ayano Fukui, Makoto Matsubayashi, Hiroyuki Tani, Kazumi Sasai
  • 雑誌名: Veterinary Immunology and Immunopathology 巻: 167(3-4) 号: 3-4 ページ: 139-46
  • DOI: 10.1016/j.vetimm.2015.07.012
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Onchocerca takaokai n. sp. (Nematoda: Filarioidea) in Japanese wild boars (Sus scrofa leucomystax): Description and molecular identification of intradermal females (2015)
  • 著者名/発表者名: Shigehiko Uni, Masako Fukuda, Takeshi Agatsuma, Odile Bain, Yasushi Otsuka, Jun Nakatani, Makoto Matsubayashi, Masashi Harada, Hasmahzaiti Omar, Rosli Ramli, Rosli Hashim, Mohd Sofian Azirun, Hiroyuki Takaoka
  • 雑誌名: Parasitology International 巻: 64 号: 6 ページ: 493-502
  • DOI: 10.1016/j.parint.2015.07.001
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] First molecular identification of Entamoeba polecki in a piglet in Japan and implications for aggravation of ileitis by coinfection with Lawsonia intracellularis (2015)
  • 著者名/発表者名: Makoto Matsubayashi, Kenta Kanamori, Masayuki Sadahiro, Masaharu Tokoro, Niichiro Abe, Makoto Haritani, Tomoyuki Shibahara
  • 雑誌名: Parasitology Research 巻: 114(8) 号: 8 ページ: 3069-73
  • DOI: 10.1007/s00436-015-4509-9
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] The detection of toxigenic Corynebacterium ulcerans from cats with nasal inflammation in Japan. (2015)
  • 著者名/発表者名: Saeki J, Katsukawa C, Matsubayashi M, Nakanishi H, Furuya M, Tani H, Sasai K.
  • 雑誌名: Epidemiol Infect. 巻: 1 号: 12 ページ: 1-6
  • DOI: 10.1017/s0950268814003550
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] 豚の消化器疾患におけるEntamoeba poleckiとEntamoeba suisの病原性 (2015)
  • 著者名/発表者名: 金森健太, 貞弘真行, 松林 誠, 所 正治, 阿部 仁一郎, 播谷 亮, 芝原友幸
  • 雑誌名: 日本豚病研究会報 巻: 67 ページ: 28-33
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] 離乳後問題となる疾病 (2015)
  • 著者名/発表者名: 芝原友幸, 宮﨑綾子, 生澤充隆, 山口遼作, 松林 誠
  • 雑誌名: 日本豚病研究会報 巻: 66 ページ: 22-25
  • NAID: 50009481708
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] パラフィン包埋切片を用いた種特異的PCRによる子牛の出血性直腸炎におけるコクシジウムの遺伝子学的同定 (2015)
  • 著者名/発表者名: 是枝輝紀，野尻麻里子，堂下さつき，松林 誠，芝原友幸，岡野良一
  • 雑誌名: 日本獣医師会雑誌 巻: 68 ページ: 297-300
  • NAID: 130005078180
  • 査読あり
• [雑誌論文] 牛のクリプトスポリジウム下痢症 「牛のクリプトスポリジウム症」 (2015)
  • 著者名/発表者名: 松林 誠
  • 雑誌名: 臨床獣医 巻: 33(3) ページ: 12-15
• [雑誌論文] 豚のアメーバ症；出血性大腸炎の豚から同定されたEntamoeba suis (2015)
  • 著者名/発表者名: 鈴田史子、松林 誠、寺山好美、下條憲吾、油井 武、播谷 亮、芝原友幸
  • 雑誌名: 日本豚病研究会報 巻: 65 ページ: 44-50
  • NAID: 50009252442
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Evaluation of Eimeria krijgsmanni as a murine model for testing the efficacy of anti-parasitic agents (2015)
  • 著者名/発表者名: Toshinori Takeo, Tetsuya Tanaka, Makoto Matsubayashi, Masashi Tsujio, Rika Umemiya-Shirafuji, Naotoshi Tsuji, Kozo Fujisaki, Toshihiro Matsui and Tomohide Matsuo
  • 雑誌名: Acta Parasitologica 巻: 60(2) ページ: 190-195
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] DB-AT: a 2015 update to the Full-parasites database brings a multitude of new transcriptomic data for apicomplexan parasites (2014)
  • 著者名/発表者名: Jakalski, M, Wakaguri H, Kischka T, Nishikawa Y, Kawazu S, Matsubayashi M, Kawahara F, Tsuji N, Cao S, Sunaga F, Xuan X, Okubo K, Igarashi I, Tuda J, Mongan A, Eshita Y, Maeda R, Makaｌowski W, Suzuki Y, Yamagishi J
  • 雑誌名: Nucleic Acids Research 巻: 43 号: D1 ページ: D631-D636
  • DOI: 10.1093/nar/gku1240
  • NAID: 120005602520
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Unusual ultrastructural characteristics and molecular identification of Entamoeba suis isolated from pigs with hemorrhagic colitis: implications for pathogenicity (2014)
  • 著者名/発表者名: Makoto Matsubayashi, Fumiko Suzuta, Yoshimi Terayama, Kengo Shimojo, Takeshi Yui, Makoto Haritani, Tomoyuki Shibahara
  • 雑誌名: Parasitology Research 巻: 113(8) 号: 8 ページ: 3023-8
  • DOI: 10.1007/s00436-014-3965-y
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Genetic analysis of Enterobius vermicularis isolated from a chimpanzee with lethal hemorrhagic colitis and pathology of the associated lesions (2014)
  • 著者名/発表者名: Yuji Yaguchi, Sachi Okabayashi, Niichiro Abe, Haruhisa Masatou, Shinya Iida, Isao Teramoto, Makoto Matsubayashi, Tomoyuki Shibahara
  • 雑誌名: Parasitology Research 巻: 113(11) 号: 11 ページ: 4105-9
  • DOI: 10.1007/s00436-014-4080-9
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Age-related detection and molecular characterization of Cryptosporidium suis and Cryptosporidium scrofarum in pre-and post-weaned piglets and adult pigs in Japan. (2014)
  • 著者名/発表者名: Takeshi Yui, Toshiyuki Nakajima, Norishige Yamamoto, Marina Kon, Niichiro Abe, Makoto Matsubayashi, Tomoyuki Shibahara.
  • 雑誌名: Parasitology Research 巻: 113(1) 号: 1 ページ: 359-65
  • DOI: 10.1007/s00436-013-3662-2
  • 査読あり
• [雑誌論文] Survey on gastrointestinal parasites and detection of Cryptosporidium spp. on cattle in West Java, Indonesia (2014)
  • 著者名/発表者名: Sylvia Maharani Ananta, Suharno, Adi Hidayat, Makoto Matsubayashi.
  • 雑誌名: Asian Pacific Journal of Tropical Medicine. 巻: 7(3) 号: 3 ページ: 197-201
  • DOI: 10.1016/s1995-7645(14)60020-1
  • 査読あり
• [雑誌論文] Localization of Eimeripain, an <i>Eimeria tenella</i> Cathepsin B-Like Cysteine Protease, during Asexual and Sexual Intracellular Development in Chicken Ceca (2014)
  • 著者名/発表者名: Makoto Matsubayashi, Takeshi Hatta, Takeharu Miyoshi, Anisuzzaman, Kazumi Sasai, Kayoko Yamaji, Kameo Shimura, Takashi Isobe, Kiyoshi Kita, Naotoshi Tsuji.
  • 雑誌名: Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ 巻: 76 号: 4 ページ: 531-537
  • DOI: 10.1292/jvms.13-0509
  • NAID: 130003382415
  • ISSN: 0916-7250, 1347-7439
  • 査読あり
• [雑誌論文] Elongation factor-1α is a novel protein associated with host cell invasion and a potential protective antigen of Cryptosporidium parvum. (2013)
  • 著者名/発表者名: Matsubayashi M, Teramoto-Kimata I, Uni S, Lillehoj HS, Matsuda H, Furuya M, Tani H, Sasai K.
  • 雑誌名: J Biol Chem. 巻: 288(47) 号: 47 ページ: 34111-34120
  • DOI: 10.1074/jbc.m113.515544
  • 査読あり
• [雑誌論文] High-throughput RNA sequencing profiles and transcriptional evidence of aerobic respiratory enzymes in sporulating oocysts and sporozoites of Eimeria tenella. (2013)
  • 著者名/発表者名: Makoto Matsubayashi, Takeshi Hatta, Takeharu Miyoshi, Anisuzzaman, Kazumi Sasai, Kameo Shimura, Takashi Isobe, Kiyoshi Kita, Naotoshi Tsuji.
  • 雑誌名: Infection, Genetics and Evolution 巻: 18 ページ: 269-76
  • DOI: 10.1016/j.meegid.2013.06.002
  • 査読あり
• [学会発表] Cryptosporidium parvum における呼吸鎖関連酵素の特性解析 (2017)
  • 著者名/発表者名: 髙橋 和瑛、松林 誠、稲岡 ダニエル 健、八田 岳士、寺本 勲、 金子 明、所 正治、古家 優、谷 浩行、辻 尚利、笹井 和美、北 潔
  • 学会等名: 第86回日本寄生虫学会
  • 発表場所: 北海道大学(北海道)
  • 年月日: 2017-05-28
• [学会発表] Cryptosporidium parvum における呼吸鎖関連酵素の特性解析 (2016)
  • 著者名/発表者名: 高橋 和瑛、松林 誠、稲岡 ダニエル 健、八田 岳士、寺本 勲、金子 明、所 正治、古家 優、谷 浩行、辻 尚利、笹井 和美、北 潔.
  • 学会等名: 第157回日本獣医学会
  • 発表場所: 日本大学(神奈川)
  • 年月日: 2016-09-06
• [学会発表] 幼雛におけるEimeria tenella弱毒株の作出および病理組織学的解析 (2016)
  • 著者名/発表者名: 松林 誠、川原 史也、八田 岳士、山岸 潤也、磯部 尚、寺本 勲、金子 明、笹井 和美、北 潔、辻 尚利
  • 学会等名: 第85回日本寄生虫学会大会
  • 発表場所: 宮崎市民プラザ(宮崎)
  • 年月日: 2016-03-19
• [学会発表] 豚の大腸から見出されたEntamoeba属原虫の種および遺伝子型の同定と病理組織学的解析 (2016)
  • 著者名/発表者名: 芝原 友幸、鈴田 史子、金森 健太、村越 奈穂子、小松 徹也、松林 誠、阿部 仁一郎、播谷 亮、所 正治
  • 学会等名: 第85回日本寄生虫学会大会
  • 発表場所: 宮崎市民プラザ(宮崎)
  • 年月日: 2016-03-19
• [学会発表] 抗鶏コクシジウム症薬の開発を目指したEimeria tenella Dihydroorotate dehydrogenaseの発現・精製と結晶化 (2015)
  • 著者名/発表者名: 長濱 まどか、佐藤 暖、志波 智生、松林 誠、 稲岡 ダニエル健、辻 尚利、北 潔、原田 繁春
  • 学会等名: 第88回日本生化学会
  • 発表場所: 京都産業大学(京都)
  • 年月日: 2015-12-01
• [学会発表] Eimeria tenella のミトコンドリア呼吸鎖酵素活性の測定と阻害剤による虫体殺滅効果 (2015)
  • 著者名/発表者名: 松林 誠、稲岡 ダニエル 健、小松谷 啓介、八田 岳士、三好 猛晴、磯部 尚、川原 史也、山岸 潤也、彦坂 健児、佐藤 暖、志波 智生、原田 繁春、北 潔、辻 尚利
  • 学会等名: 第157回日本獣医学会学術集会
  • 発表場所: 北里大学(十和田）
  • 年月日: 2015-09-07
• [学会発表] A novel biological insight into the comparative transcriptional profiling between virulent and precocious strains at invasive stage of Eimeria tenella (2014)
  • 著者名/発表者名: Makoto Matsubayashi, Fumiya Kawahara, Takeshi Hatta, Takeharu Miyoshi, Junya Yamagishi, Anisuzzaman, Kameo Shimura, Takashi Isobe, Kiyoshi Kita, Akira Iwata, Naotoshi Tsuji
  • 学会等名: 17th Japanese-German Cooperative Symposium on Protozoan Disease
  • 発表場所: Dresden University of Technology (Dresden, Germany)
  • 年月日: 2014-10-01 – 2014-10-03
• [学会発表] A novel biological insight into the comparative transcriptional profiling between virulent and precocious strains at invasive stage of Eimeria tenella (2014)
  • 著者名/発表者名: Makoto Matsubayashi, Fumiya Kawahara, Takeshi Hatta, Takeharu Miyoshi, Junya Yamagishi, Anisuzzaman, Kameo Shimura, Takashi Isobe, Kiyoshi Kita, Akira Iwata, Naotoshi Tsuji
  • 学会等名: 11th International Coccidiosis Conference
  • 発表場所: Dresden University of Technology (Dresden, Germany)
  • 年月日: 2014-09-26 – 2014-09-30
• [学会発表] Eimeria tenella スポロゾイトのミトコンドリア精製法の確立と呼吸鎖酵素活性 (2014)
  • 著者名/発表者名: 松林 誠、稲岡 ダニエル 健、小松谷 啓介、八田 岳士、三好 猛晴、磯部 尚、川原 史也、山岸 潤也、彦坂 健児、佐藤 暖、志波 智生、原田 繁春、北 潔、辻 尚利
  • 学会等名: 第157回日本獣医学会学術集会
  • 発表場所: 北海道大学(北海道札幌市)
  • 年月日: 2014-09-09 – 2014-09-12
• [学会発表] マウス寄生性コクシジウムEimeria krijgsmanniの生活環に関する形態学的観察 (2014)
  • 著者名/発表者名: 小野 結菜、松林 誠、川口 博明、辻尾 祐志、田仲 哲也、三好 宣彰、松井 利博、松尾 智英
  • 学会等名: 第157回日本獣医学会学術集会
  • 発表場所: 北海道大学(北海道札幌市)
  • 年月日: 2014-09-09 – 2014-09-12
• [学会発表] 次世代シークエンサーを用いたEimeria tenella 強毒株と弱毒株スポロゾイトの遺伝子発現プロファイリング (2014)
  • 著者名/発表者名: 松林 誠、川原 史也、八田 岳士、三好 猛晴、山岸 潤也、Anisuzzaman M、磯部 尚、北 潔、岩田 晃、辻 尚利.
  • 学会等名: 第83回日本寄生虫学会大会学術集会
  • 発表場所: 愛媛大学
• [学会発表] Eimeria tenella 強毒株と弱毒株スポロゾイトの比較トランスクリプトーム解析. 、238. (2013)
  • 著者名/発表者名: 松林 誠、川原 史也、八田 岳士、三好 猛晴、山岸 潤也、M アニスザマン、志村 亀夫、磯部 尚、岩田 晃、辻 尚利.
  • 学会等名: 第156回日本獣医学会学術集会
  • 発表場所: 岐阜大学
• [学会発表] Eimeria tenella 強毒株と弱毒株スポロゾイトの網羅的遺伝子発現比較解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 松林 誠、川原史也、八田岳士、三好猛晴、山岸潤也、アニスザマン、志村亀夫、磯部 尚、北潔、岩田 晃、辻 尚利.
  • 学会等名: 第11回分子寄生虫・マラリア研究フォーラム
  • 発表場所: 長崎大学